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淀粉磷酸化酶(SP)測(cè)試盒50管/48樣

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更新時(shí)間:2022-06-17 16:25:29瀏覽次數(shù):245

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50管/48樣
貨號(hào) AS6321214 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 檢測(cè)方法 紫外分光光度法
淀粉磷酸化酶(SP)測(cè)試盒50管/48樣公司正在出售的產(chǎn)品:神經(jīng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體PS-1(NT),Presennillin-1(S182) 早老蛋白-1(抗原)
原癌基因K-ras抗體PS-1,Presennillin-1(CT) 早老蛋白-1(S182)
腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因抗體BRCA1(Breast cancer susceptbility gene 1)(mouse rat) 癌易感基因

詳細(xì)介紹

商品介紹:

測(cè)定意義:

淀粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase,SP)是淀粉代謝過(guò)程的可逆反應(yīng)酶,既可催化淀粉的合成,也可催化淀粉的分解。

在高等植物中,淀粉磷酸化酶(合成方向)主要存在于質(zhì)體中,負(fù)責(zé)延長(zhǎng)淀粉的 α-1,4-葡萄糖鏈的非還原末端;淀粉磷酸化酶(分解方向)主要存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中,催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵磷酸解產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸,負(fù)責(zé)葡萄糖鏈的磷酸解,是淀粉代謝過(guò)程中的關(guān)鍵酶。

在植物體中,淀粉磷酸化酶分解方向的底物無(wú)機(jī)磷濃度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷酸濃度幾乎高了兩個(gè)數(shù)量級(jí),一般認(rèn)為淀粉磷酸化酶只催化淀粉的分解,因此,分解方向的淀粉磷酸化酶具有重要測(cè)定意義。

測(cè)定原理:

淀粉磷酸化酶催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵與無(wú)機(jī)磷反應(yīng)產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸,葡萄糖-1-磷酸在磷酸葡萄糖變位酶的作用下產(chǎn)生葡萄糖-6-磷酸,并在6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化下還原NADP+產(chǎn)生NADPH,使340nm下吸光值增加。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

商品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

淀粉磷酸化酶(SP)測(cè)試盒50管/48樣

檢測(cè)方法

紫外分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格

50管/48樣

產(chǎn)品貨號(hào)

AS6321214

試劑的組成和配制:

酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。

自備儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

NAD+和NADH的提取:

1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取

NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建

議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);

冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中

和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建

議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);

冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中

和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span>

NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g

組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴

中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

NADH的提取:按照組織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g

組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴

中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和,

混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提取:

NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性

提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液),

超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min

(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加

入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿

性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液),

超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min

(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加

入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

ADH測(cè)定操作:

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。

3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。

4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4。△A測(cè)定管=A3-A4。

注意:空白管只需測(cè)定一次。

白花前胡A英文名: 2-Naphthol白介1受體9抗體包裝5g

白花前胡(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 1-Nitroso-2-NaphtholRasGTP激活蛋白IQGAP3抗體包裝5g

白花前胡乙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Sulfochlorophenol S sodium calcium saltIroquois同源蛋白1抗體包裝100g

白花蛇舌草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 1-Naphthol跨膜蛋白BRI抗體包裝25g

白樺脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Guaiacol跨膜蛋白ITM2C抗體包裝10g

白樺脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: NaphtholAS白介31抗體包裝1g

白樺脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Anthrone人血清型免疫球蛋白A抗體包裝25g

白及(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Thiomichler's ketoneIrx3蛋白抗體包裝5g

白蠟樹(shù)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Ninhydrin 頂端體蛋白10抗體包裝1g

白蘞(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Phenidone人分泌型免疫球蛋白A包裝250mg

白麻苷英文名: ARA-AMP;Vidarabine monophosphate胰島自身抗原1抗體包裝1g

白茅根(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: α-Naphthoflavone胰島基因增強(qiáng)結(jié)合蛋白2抗體包裝25g

白皮杉,3'-羥基白藜蘆;比杉特(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Murexide白介-16抗體包裝5g

白皮杉-3'-O-葡萄糖苷英文名: Hydroxylammonium chloride離子鈣接頭蛋白抗體包裝25ml

白前(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 3,3'-DimethylnaphthidineIroquois同源蛋白4抗體包裝250mg

: FERMBP3825資源名稱(chēng): 惡臭假單胞菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP,Aromatase inhibitor類(lèi)風(fēng)濕因子試劑盒胡桃醌;

蜜蜂生球擬酵母Torulopsis│apicola 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品類(lèi)風(fēng)濕因子試劑盒灰氈毛忍冬皂苷;Macranthoid

諾氏菌屬菌種Nocardia│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,AR類(lèi)風(fēng)濕因子試劑盒海藻糖;Trehalose
淀粉磷酸化酶(SP)測(cè)試盒50管/48樣紅色紅曲霉 N-Boc-2,5-二氫-1H-吡咯6-磷酸果糖激Elisa

葡萄座腔 烯酸乙氧基乙氧基乙酯山梨氧化Elisa

賴(lài)芽胞桿屬 N(α)-Boc-L-2,3-二蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)體Elisa

禾赤鐮孢 2-溴蒽糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Elisa

Debaryomyces prosopidis 雙(頻哪合)二單糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Elisa

土曲霉 5-溴-2-噻吩羧酸馬鈴薯病YElisa

枯草芽孢桿 甘-15N馬鈴薯病AElisa

樹(shù)舌 3--4-吡啶甲馬鈴薯病SElisa

飼料類(lèi)芽孢桿 維地洛馬鈴薯病MElisa

慢生根瘤 trans-4-(4-ethylcyclohexyl)benzonitrile谷氨酰Elisa

香菇 (R)-1-Boc-3-羧基吡咯烷尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化Elisa

ATCC 700324 4,4′-二叔丁基-2,2′-聯(lián)吡啶赤霉合成Elisa

澳型核果褐腐病 氘代吡啶-d5花青Elisa

截形炭團(tuán) 4,4'-二甲氧基二苯甲萘乙酸Elisa

球孢白僵 β-D-別吡喃糖赤霉8Elisa
注意事項(xiàng):

①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。

 


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