公司產(chǎn)品僅供科研使用:
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義: 脂質(zhì)過氧化是動(dòng)植物體內(nèi)活性氧(ROS)氧化生物膜的過程,脂質(zhì)過氧化物(LPO)是脂質(zhì)過氧化過程的產(chǎn)物,即ROS與生物膜的磷脂、酶和膜受體相關(guān)的多不飽和脂肪酸的側(cè)鏈及核酸等大分子物質(zhì)起脂質(zhì)過氧化反應(yīng)形成LPO,使細(xì)胞膜的流動(dòng)性和通透性發(fā)生改變,最終導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的改變。因此,LPO常被作為機(jī)體氧化應(yīng)激的一種指標(biāo),與某些疾病的病理過程,如腫瘤、化學(xué)中毒、感染、炎 癥、自身免疫疾病、動(dòng)脈粥樣硬化(AS)及心腦血管疾病,以及衰老等生理過程密切相關(guān)。 測(cè)定原理: LPO在酸性條件下加熱,產(chǎn)生小分子終產(chǎn)物MDA,MDA與硫代巴bi妥酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,在535nm有最大吸收峰。 需自備的儀器和用品: 分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
乳腺癌易感蛋白2(BRCA2)英文名:BRCA2 ELISA Kit分裂周期樣激2抗體包裝25g
乳鐵傳遞蛋白(LTF)英文名:LTF ELISA Kit分裂周期樣激3抗體包裝5g
乳脫氫B(LDHB)英文名:LDHB ELISA Kit17號(hào)染色體開放閱讀框49抗體包裝1g
乳過氧化物(LPO)英文名:LPO ELISA Kit17號(hào)染色體開放閱讀框53抗體包裝25g
肉毒堿棕櫚酰基轉(zhuǎn)移1A(CPT1A)英文名:CPT1A ELISA Kit17號(hào)染色體開放閱讀框57抗體包裝5g
肉毒堿乙酰轉(zhuǎn)移(CRAT)英文名:CRAT ELISA Kit17號(hào)染色體開放閱讀框64抗體包裝1g
融合蛋白(FUS)英文名:FUS ELISA Kit17號(hào)染色體開放閱讀框66抗體包裝250mg
溶質(zhì)載體家族30成員7(SLC30A7)英文名:SLC30A7 ELISA Kit17號(hào)染色體開放閱讀框74抗體包裝1g
溶質(zhì)載體家族30成員6(SLC30A6)英文名:SLC30A6 ELISA Kit17號(hào)染色體開放閱讀框75抗體包裝250mg
溶質(zhì)載體家族30成員5(SLC30A5)英文名:SLC30A5 ELISA Kit17號(hào)染色體開放閱讀框77抗體包裝5g
溶質(zhì)載體家族30成員4(SLC30A4)英文名:SLC30A4 ELISA Kit17號(hào)染色體開放閱讀框78抗體包裝1g
溶質(zhì)載體家族30成員3(SLC30A3)英文名:SLC30A3 ELISA Kit維調(diào)節(jié)核基質(zhì)相關(guān)蛋白抗體包裝5g
溶質(zhì)載體家族30成員10(SLC30A10)英文名:SLC30A10 ELISA Kit17號(hào)染色體開放閱讀框42抗體包裝1g
溶質(zhì)載體家族30成員1(SLC30A1)英文名:SLC30A1 ELISA Kit17號(hào)染色體開放閱讀框97抗體包裝250mg
溶血?;D(zhuǎn)移4(LPCAT4)英文名:LPCAT4 ELISA Kit貓眼綜合征染色體候選基因1抗體包裝100g
猴頭菌Hericium│erinaceus (Bull.) Pers. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1試劑盒蔗糖;Sucrose
芽胞桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:945-1030 ug /mg,二物轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α試劑盒正丁基酞;3-n-Butylphath
結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定轉(zhuǎn)谷酰2C多肽試劑盒知母皂苷B;Anemarsaponin
脂質(zhì)過氧化物(LPO)測(cè)試盒50管/48樣多主葡萄殼 3--2-甲氧基砒啶血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物Elisa
枯草芽孢桿 5--2-甲氧基吡啶血紅結(jié)合蛋白Elisa
瓜亡革 5-溴-2-甲氧基-3-硝基砒啶血紅氧合1Elisa
平菇 3-溴-2-甲氧基吡啶血漿α顆粒膜蛋白Elisa
木糖葡糖酸醋桿 鎢酸鈉血漿淀粉樣蛋白PElisa
釀酒酵母 2,6-二苯甲血漿抗凝蛋白CElisa
澳型核果褐腐病 3-溴-2-羥基吡啶血漿抗凝蛋白SElisa
鼠傷寒沙門氏 2-羥基-5-溴吡啶血漿絲蛋白抑制劑Elisa
殼 溴化鋰水合物血凝樣氧化低密度脂蛋白受體-1Elisa
熱帶假絲酵母 3,5-二氟-4-異氧基血清白蛋白Elisa
枇杷假尾孢褐斑病 4-羥基-6,7-二甲氧基喹啉血清低半乳糖化IgA1Elisa
香菇 間氟苯磺酰血清淀粉樣蛋白AElisa
毛簇木霉 4-氨基-2-氟鹽酸鹽血清淀粉樣蛋白A1Elisa
解淀粉芽孢桿植物亞種 L-叔丁酯鹽酸鹽血清鐵Elisa
禽腺病 3,5-二水楊酸血清鐵蛋白Elisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。