商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義: DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動(dòng)物(腸粘膜、肺、肝臟、腎臟等)、植物和微生物中。催化多胺氧化為醛,其活性與核酸和蛋白合成密切相關(guān),能夠反映腸道機(jī)械屏障的完整性和受損傷程度。 測(cè)定原理: DAO催化尸胺產(chǎn)生醛和過(guò)氧化氫,外源添加過(guò)量的辣根過(guò)氧化物酶,催化過(guò)氧化氫氧化鄰聯(lián)茴香胺生成有色物質(zhì),在460nm處有特征吸收峰,通過(guò)測(cè)定該波長(zhǎng)吸光度增加速率,計(jì)算DAO活性。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器: 天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
肌侵蛋白(MTPN)英文名:MTPN ELISA Kit磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝5g
肌腱蛋白X(TNX)英文名:TNX ELISA Kit磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝5MG
肌肌激(CKM)英文名:CKM ELISA Kit磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝1g
肌紅蛋白(MYO)英文名:MYO ELISA Kit磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝5g
三磷(ITPA)英文名:ITPA ELISA KitβA3/A1-crystallin蛋白抗體包裝25g
肌鈣蛋白T()英文名: ELISA KitγS-crystallin蛋白抗體包裝100g
肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合體亞基4(ARPC4)英文名:ARPC4 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框85抗體包裝25g
饑餓(GHRL)英文名:GHRL ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框87抗體包裝5g
回腸脂肪結(jié)合蛋白(FABP6)英文名:FABP6 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框95抗體包裝25g
黃體激(LH)英文名:LH ELISA Kit補(bǔ)體C1S鏈多肽抗體包裝5g
脫氫(XDH)英文名:XDH ELISA Kit20號(hào)染色體開放閱讀框106抗體包裝50g
緩激肽(BK)英文名:BK ELISA Kit20號(hào)染色體開放閱讀框107抗體包裝100g
環(huán)氧化合物解4(EPHX4)英文名:EPHX4 ELISA Kit20號(hào)染色體開放閱讀框117抗體包裝25g
環(huán)加氧2(PTGS2)英文名:PTGS2 ELISA Kit20號(hào)染色體開放閱讀框118抗體包裝100g
環(huán)加氧1(PTGS1)英文名:PTGS1 ELISA Kit20號(hào)染色體開放閱讀框144抗體包裝25g
曲霉Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品整合α2試劑盒乙酰紫草;Acetylshikonin
型副傷寒沙門菌Salmonella│paratyphi A 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,USP34,BR,可用于培養(yǎng)整合A5試劑盒異丹葉大黃;Isorhapontige
花津浦芽孢桿菌Bacillus│hwajinpoensis 質(zhì)量規(guī)格:>97%,USP34,BR真胰島試劑盒7-乙基;7-Ethylcampt
二胺氧化酶(DAO)測(cè)試盒100管/48樣平菇—875 6-溴-4-羥基-3-喹啉羧酸乙酯組Elisa
異形盤孢 酸-2-苯乙酯組蛋白H3Elisa
蘇云金芽孢桿 酸苯甲酯組蛋白H4Elisa
葡萄座腔 2-脫氧-2,2-二氟-D-赤式-五糖-3,5-二苯甲酯-1-甲磺酸酯組蛋白去乙?;疎lisa
新城疫病 磺間甲氧嘧啶組蛋白去乙?;?Elisa
孢吸水鏈霉 2,5-吡二羧酸組蛋白去乙酰化3Elisa
巴氏醋桿 對(duì)乙酮組蛋白去乙?;?Elisa
小豆交鏈孢霉 對(duì)羥基正辛酯組蛋白乙?;疎lisa
副豬嗜血桿 2'--4',5'-二氟苯乙酮組織蛋白BElisa
栗疫 2-甲氧基-3-三氟組織蛋白KElisa
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿 5-溴-2-苯甲組織蛋白LElisa
芍藥枝孢霉 2-甲氧基-3-三氟甲基-5-溴吡啶組織蛋白SElisa
釀酒酵母 3,5-二氟-4-吡啶甲組織蛋白XElisa
樹舌靈芝 硫化鋰組織多肽抗原Elisa
變異鏈霉 亞乙基脲(2-咪唑酮)組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因AElisa