商品屬性:
商品介紹:
測(cè)定意義: 植物酚類(lèi)物質(zhì)具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和醫(yī)療保健作用而廣泛應(yīng)用于化妝品、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。 測(cè)定原理: 在堿性條件下,酚類(lèi)物質(zhì)將鎢鉬酸還原,產(chǎn)生藍(lán)色化合物,在760nm處有特征吸收峰,測(cè)760nm處的吸光值,即可得樣品總酚含量。 需自備的儀器和用品: 天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測(cè)定管=A3-A4。
注意:空白管只需測(cè)定一次。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。
叉頭框蛋白O3(FOXO3)英文名:FOXO3 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄同源蛋白質(zhì)CUX2抗體包裝1g
叉頭框蛋白M1(FOXM1)英文名:FOXM1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白146抗體包裝5g
叉頭框蛋白A2(FOXA2)英文名:FOXA2 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白147抗體包裝1g
層粘連蛋白β1(LAMβ1)英文名:LAMβ1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白158抗體包裝250mg
層粘連蛋白α1(LAMα1)英文名:LAMα1 ELISA Kit鈣粘附蛋白-11抗體包裝100g
補(bǔ)體因子D(CFD)英文名:CFD ELISA Kit核仁蛋白C23抗體包裝25g
補(bǔ)體因子B(CFB)英文名:CFB ELISA Kit皮膚相互作用蛋白2抗體包裝5g
補(bǔ)體成分5a受體1(C5aR1)英文名:C5aR1 ELISA Kit1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框149抗體包裝25g
補(bǔ)體成分5a(C5a)英文名:C5a ELISA Kit碳化合物激結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)抗體包裝5g
補(bǔ)體成分5(C5)英文名:C5 ELISA Kit尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝1g
補(bǔ)體成分4b(C4b)英文名:C4b ELISA Kit補(bǔ)體C1qTNF8鏈多肽抗體包裝5g
補(bǔ)體成分4a(C4a)英文名:C4a ELISA Kit21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框62抗體包裝1g
補(bǔ)體成分4(C4)英文名:C4 ELISA Kit磷化胞漿型磷脂A2抗體包裝5g
補(bǔ)體成分3(C3)英文名:C3 ELISA Kit9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框46抗體包裝1g
補(bǔ)體3a(C3a)英文名:C3a ELISA Kit20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框103抗體包裝25g
鯊魚(yú)弧菌Vibrio│carchariae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品游離雌三試劑盒異鼠李-3-O-半乳糖苷;Isorha
假交替單胞菌Pseudoalteromonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR游離β絨毛膜促性腺激試劑盒茵芋堿;Skimmianine
沙門(mén)氏菌Salmonella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定幽門(mén)螺旋菌抗體試劑盒一枝蒿庚;Bullatine G;so
植物總酚(Tp)測(cè)試盒50管/24樣釀酒酵母 福霉SApat-1Elisa
松針散斑殼 3,4-二溴吡啶克氏錐蟲(chóng)Elisa
枯草芽孢桿 (R)-2-甲基吡咯烷鹽酸鹽溶Elisa
深紅酵母 4-甲基-5-甲氧基-1,2,4-三唑啉-3-酮凋亡激活因子Elisa
微白類(lèi)諾氏 (1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲支鏈氨基酸Elisa
凱斯特鞘氨單胞 4-氟間苯二肝糖原Elisa
尖角凸臍蠕孢 鹽酸沙格雷酯PPP1CaElisa
薔薇生鏈格孢 2-甲基硫代酰幽門(mén)螺桿IgG抗體Elisa
假單胞屬 4-芐基-2-嗎琳羧酸鹽酸鹽蛋白精甲基轉(zhuǎn)移1Elisa
Microterricola viridarii (S)-N-Boc-2-羥甲基嗎啉分泌型卷曲相關(guān)蛋白1Elisa
蘇云金芽孢桿 (R)-N-Boc-2-羥甲基嗎啉Dickkopf 3Elisa
膠孢 4-Boc-2-羥甲基嗎啉CTXIIIElisa
孢吸水鏈霉昆明變種 3--4-苯5α-雙氫睪酮 Elisa
pYES3/CT 3--6-噠性別決定區(qū)Y蛋白Elisa
青霉(加詞待譯) 4-羥基環(huán)己酮腎綜合征出血熱病抗體Elisa