商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義: 細(xì)胞色素P450酶是一組主要存在于肝臟的酶系,在外源物質(zhì)代謝中,尤其是藥物和毒物的代謝,具有重要作用。ERND在P450酶系中相當(dāng)于CYP2B亞型,與藥物代謝的去甲基化密切相關(guān)。CYP2B具有催化底物形成非活性易于排泄的代謝產(chǎn)物而具有解毒作用,也可使某些藥物經(jīng)CYP2B代謝活化。 測(cè)定原理: ERND催化紅霉素釋放甲醛,通過Nash比色測(cè)定甲醛含量,即可計(jì)算出ERND活性。 自備儀器和用品: 普通離心機(jī),超速離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水和冰。 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
柚皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 1,8-Dihydroxyanthraquinone胚胎干關(guān)鍵蛋白抗體包裝25ml
右旋蛇菰寧英文名: Chlorhexidine hydrochloride核小體組裝蛋白1抗體包裝500ml
右旋延胡索乙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Methoxyphenamine HClN-鈣粘附分子抗體包裝100g
幼枝含斷氧化馬錢子甙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Potassium guaiacolsulfonate hemihydrate核受體輔助抑制因子1抗體包裝25g
余甘子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Propyl gallate腎小球粘附分子受體抗體包裝100g
魚腥草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Chlormezanone巢蛋白/神經(jīng)上皮干蛋白抗體包裝25g
羽扇豆(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Calcium hydrogenphosphate dihydrate巢蛋白/神經(jīng)上皮干蛋白抗體包裝5g
羽扇豆鹼(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Sulfamethazine蛋白激錨定蛋白抗體包裝1g
玉米須(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Sulfaguanidine絲或半胱蛋白解抑制蛋白1抗體包裝5g
玉葉金花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Fenbufen黑色瘤硫軟骨蛋白多糖抗體包裝100ml
郁金(溫郁金)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Troxerutin突觸粘附分子3抗體包裝100g
預(yù)知子(三葉木通)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Diprophylline跨膜硫軟骨蛋白聚糖C抗體包裝25g
愈創(chuàng)木英文名: Bendazol hydrochloride神經(jīng)腫瘤Nova1抗原抗體包裝500g
鳶尾苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Chloroquine diphosphateB淋巴鏈接激活蛋白抗體包裝1g
鳶尾黃-7-O-木糖基葡萄糖苷英文名: Promethazine Hydrochloride中性鞘磷脂2抗體包裝250mg
: C.DAi-426資源名稱: 亞桑那沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%狀腺激受體β試劑盒草烏;Bulleyaconitine
皮落青霉Penicillium│solitum var. crustosum (Thom) Bridge D. Hawksw. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品狀腺過氧化物試劑盒長(zhǎng)春新堿;Vincristine
阿斯加鞘盒菌Sphingopyxis│alaskensis 質(zhì)量規(guī)格:>99%狀腺肽激抗體試劑盒長(zhǎng)春花堿;Vinblastine
紅霉素N脫甲基酶(ERND)測(cè)試盒100管/48樣球形賴芽孢桿 5-溴-6-甲酯中性膽固Elisa
滑假絲酵母 2-氨基-1-(2,4-二氟苯基)乙酮鹽酸鹽中性粒彈性蛋白Elisa
波蘭青霉 2-(甲基)-1-甲基-1H-咪唑鹽酸鹽中性粒堿性磷酸Elisa
緩慢葡萄球 3-溴-2-氟中性粒明膠相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白Elisa
釀酒酵母 3-氨基-5-氟中性內(nèi)肽;腦啡肽Elisa
植物乳桿 鹽酸特比萘腫瘤壞死因子αElisa
赤曲霉 2,5-二-3-腫瘤壞死因子βElisa
黑烏霉 2-溴三苯腫瘤壞死因子γElisa
煙色毛霉 噻螨酮腫瘤壞死因子可溶性受體ⅠElisa
嗜熱鏈球 2-溴-4-(三氟甲基)嘧啶腫瘤壞死因子可溶性受體ⅡElisa
Aquibacillus halophilus 全氟十二烷基三硅烷腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體Elisa
角鱗灰鵝膏 四-(4-氨基苯)乙烯周期蛋白G2Elisa
鐮孢 三辛基氧化磷周生長(zhǎng)因子Elisa
泡囊短波單胞 4-氟-3-甲氧基轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子αElisa
溜曲霉 2-氟-6-甲氧基苯酸轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子βElisa