商品介紹:
測(cè)定意義: 皂苷(Saponin)是苷元為三萜或螺旋甾烷類化合物的一類糖苷,主要分布于陸地高等植物中,也少量存在于海星和海參等海洋生物中。 許多中草藥如人參、遠(yuǎn)志、桔梗、甘草、知母和柴胡等的主要有效成分都含有皂苷。有些皂苷還具有抗菌的活性或解熱、鎮(zhèn)靜、抗癌等有價(jià)值的生物活性。 測(cè)定原理: 使用超聲波提取樣品中的皂苷,利用香草醛-高氯酸顯色體系測(cè)定總皂苷含量。 所需的儀器和用品: 可見分光光度計(jì)、烘箱、水浴鍋、移液器、1mL玻璃比色皿、高氯酸、乙酸、超聲清洗器 |
商品屬性:
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4。△A測(cè)定管=A3-A4。
注意:空白管只需測(cè)定一次。
*發(fā)根土壤桿菌6號(hào)染色體開放閱讀框50抗體Human rT3(Reverse Triiodothyronine) ELISA Kit人糖脂抗體(glycolipid)免疫試劑盒
尖槐藤根瘤菌1號(hào)染色體開放閱讀框151抗體Human SCG2(Secretogranin II) ELISA Kit人糖盞蛋白免疫試劑盒
黑褐鵝膏菌腫瘤壞死因子受體超家族成員9抗體Human RXFP1(Relaxin/Insulin Like Family Peptide Receptor 1) ELISA Kit人糖原磷化同工MM(GP-MM)免疫試劑盒
高盧根瘤菌復(fù)合前列腺特異性抗原單克抗體Human RNASE(Ribonuclease) ELISA Kit人糖原磷化同工II(GP-II)免疫試劑盒
松口蘑組織蛋白z抗體Human SDH(Succinate Dehydrogenase) ELISA Kit人糖原磷化同工BB(GP-BB)免疫試劑盒
鮑魚菇2號(hào)染色體開放閱讀框84抗體Human RNASEN(Ribonuclease III, Nuclear) ELISA Kit人糖原磷化(GP)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌枯草亞種磷化鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激2α抗體Human sdLDL(Small Dense Low Density Lipoprotein) ELISA Kit人糖原合成激3(GSK-3)免疫試劑盒
樟疫霉組織蛋白A抗體Human RNASET2(Ribonuclease T2) ELISA Kit人糖原合成激(GSK)免疫試劑盒
擬康寧木霉CD34抗體Human RPS6Kβ1(Ribosomal Protein S6 Kinase Beta 1) ELISA Kit人糖原合成免疫試劑盒
擬青霉周期D3抗體Human Sec23b(protein transport protein Sec23B) ELISA Kit人糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)免疫試劑盒
嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌緊密連接蛋白1抗體(C端)Human RTN4(Reticulon 4) ELISA Kit人糖皮質(zhì)激受體β(GR-β)免疫試劑盒
蓋氏海桿狀菌轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP α 抗體Human rT3(Reverse Triiodothyronine) ELISA Kit人糖皮質(zhì)激受體α(GR-α)免疫試劑盒
帚狀曲霉核黃轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體Human proPSA(precursor of Prostate Specific Antigen) ELISA Kit人糖磷脂酰肌(GPI)免疫試劑盒
大腸埃希菌磷化鈣介質(zhì)抗體Human RARS(Arginyl tRNA Synthetase, cytoplasmic) ELISA Kit人糖類抗原72-4(CA72-4)免疫試劑盒
粘孢白僵菌7號(hào)染色體開放閱讀框26抗體Human RARα(Retinoic Acid Receptor Alpha) ELISA Kit人糖類抗原50(CA50)免疫試劑盒
黃曲霉衰變加速因子CD55抗體Human PRR4(Proline Rich Protein 4, Lacrimal) ELISA Kit人糖類抗原19-9(CA19-9)免疫試劑盒
海桿狀菌Marinobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:活:>200 NADP units/mg,BCc-fos 二氫歐山芹醋酯
假單胞菌Pseudomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRCDCP1試劑盒二氫魚藤
指狀青霉Penicillium│digitatum 質(zhì)量規(guī)格:>96%,BRCD8分子試劑盒二氫黃連堿
總皂苷含量測(cè)試盒50管/48樣枯草芽孢桿 4-乙基環(huán)己酮鹽酸二甲雙胍Elisa
斯氏土地桿 胞啶-5'-二磷酸 二鈉鹽Ras 蛋白Elisa
毛栓 乙酸鍶干擾誘導(dǎo)蛋白1Elisa
盤長(zhǎng)孢狀盤孢 4-羥基-3-硝基吡啶載脂蛋白B48Elisa
土生叢毛單胞 2-庚Ca-Mg-ATPElisa
4-異基環(huán)己酮巨噬炎性蛋白Elisa
聚酵芽孢桿 3-芐氧基溴烷Ⅰ型膠原α1Elisa
釀酒酵母 鹽酸苯吖啶Ⅰ型膠原α2Elisa
秀珍菇 4-溴 氫鹽線粒體呼吸鏈復(fù)合物IIElisa
雞傳染性支氣管炎病 5-硝基-2-線粒體呼吸鏈復(fù)合物IVElisa
球孢白僵 (+)-γ-維生EGremlin-1蛋白Elisa
榆耳 1,10-菲羅啉-5-氨基P-CREBElisa
香菇 2,4-二-6-甲基嘧啶UDP葡糖酸基轉(zhuǎn)移1家族多肽A1Elisa
Thermoactinomyces? 3-氨基吡-2-羧酸UDP葡糖酸基轉(zhuǎn)移1家族多肽A3Elisa
Nocardioides DL-α-氨基己二酸UDP葡糖酸基轉(zhuǎn)移1家族多肽A4Elisa
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。