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詳細介紹
商品介紹：
測定意義： GCS（EC 2.4.1.11）催化UDPG和葡萄糖殘基生成糖原和UTP，以α-1，4-糖苷鍵相連延長糖鏈，是肝和肌肉糖原合成酶的限速酶，是胰島素作用的主要靶酶，對糖代謝的調(diào)節(jié)和血糖穩(wěn)態(tài)的維持具有重要作用。 測定原理： GCS催化UDPG和葡萄糖殘基生成糖原和UTP，丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進一步依次催化NADH氧化生成NAD+，在340nm下測定NADH下降速率，即可反映GCS活性。 需自備的儀器和用品： 紫外分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL微量石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 紫外分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321377 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取：按照組織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi)，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi)，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4?！鰽測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
谷棒桿菌Ⅲ型磷化絲切蛋白抗體Human FGL1(Fibrinogen Like Protein 1) ELISA Kit人泡狀過表達癌癥促生存蛋白1(VOPP1/ECOP/GASP)免疫試劑盒
中慢生華癸根瘤菌磷化周期檢測點激2抗體Human FGL2(Fibrinogen Like Protein 2) ELISA Kit人排序連接蛋白3(SNX3)免疫試劑盒
庫爾勒海洋桿菌磷化分裂周期蛋白25抗體Human FRS2(Fibroblast Growth Factor Receptor SubstRate 2) ELISA Kit人偶聯(lián)因子6(CF6)免疫試劑盒
香菇磷化分裂周期蛋白25抗體Human fPSA(Free Prostate Specific Antigen) ELISA Kit人牛小腸堿性磷(CIAP)免疫試劑盒
木糖葡糖醋桿菌后期促進復合蛋白3抗體Human FSHR(Follicle Stimulating Hormone Receptor) ELISA Kit人牛奶過敏原特異性IgE抗體免疫試劑盒
植物乳桿菌磷化CRK抗體Human FGL1(Fibrinogen Like Protein 1) ELISA Kit人牛兒基焦磷合(GGPS1)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌鈣粘蛋白6抗體Human FGFR4(Fibroblast Growth Factor Receptor 4) ELISA Kit人XIIIB鏈(F13B)免疫試劑盒
黃曲霉鈣粘蛋白23抗體Human FGL2(Fibrinogen Like Protein 2) ELISA Kit人XIII A1(F13A1)免疫試劑盒
羅伊氏乳桿菌小腦變性相關蛋白2抗體Human FGβ(Fibrinogen Beta) ELISA Kit人VIII(FVⅢ)免疫試劑盒
銅綠假單胞菌分裂周期2相關蛋白激7抗體Human FGα(Fibrinogen Alpha) ELISA Kit人Ⅻ(FⅫ)免疫試劑盒
釀酒酵母A型產(chǎn)氣莢膜梭菌(魏氏梭菌)Human f-Hb(Free Haemoglobin) ELISA Kit人ⅩⅢ(FⅩⅢ)免疫試劑盒
白姬松茸磷化角蛋白18抗體Human FLNα(Filamin A, Alpha) ELISA Kit人Ⅷ相關抗原(Ⅷ-Ag)免疫試劑盒
橙鱗傘胞嘧啶脫抗體Human FGα(Fibrinogen Alpha) ELISA Kit人Ⅶ(FⅦ)免疫試劑盒
釀酒酵母C2GNT3蛋白抗體Human FGβ(Fibrinogen Beta) ELISA Kit人Ⅴ(FⅤ)免疫試劑盒
蟋蟀草平臍蠕孢磷化原癌基因c-Jun抗體Human FcγR3B(Fc Fragment of IgG Low Affinity IIIb Receptor) ELISA Kit人Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒
細鏈格孢磷化原癌基因c-Jun抗體Human POTE-E(POTE-E(POTE Ankyrin Domain Family Member E)) ELISA Kit人凝血原前體蛋白(PIVKA-II)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌枯草亞種Bacillus│subtilis subsp. subtilis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBcl-2樣蛋白1試劑盒粗壯女貞苷N
輪枝菌Verticillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>85%,分子生物學級B7-H4 查斯馬寧
AS2.185資源名稱: 釀酒酵母 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRA組鏈球菌菌壁多糖抗體試劑盒川翠定
糖原合成酶（GCS）測試盒50管/48樣枯草芽孢桿 N,N'-二環(huán)己基-4-嗎啉脒一氧化氮代謝產(chǎn)物Elisa
大腸埃希氏 甲基酯硫酸類肝Elisa
蘑菇輪枝孢 對溴肉桂多藥耐藥基因Elisa
熱帶假絲酵母 三（2,4-二甲苯基）膦絲消旋Elisa
枯草芽孢桿 2-乙?；?6-溴吡啶甲狀腺轉(zhuǎn)運體 Elisa
Bacillus aryabhattai Shivaji et al. 6-溴-4-二氫色原酮消退D1Elisa
短小芽孢桿 5-溴喹啉脂氧A4Elisa
齒孢青霉 甘脲豆莢蛋白Elisa
豬瘟病RT-nPCRElisa 3-(2-羥基苯基)酸白介37Elisa
大腸埃希氏 對叔丁基芐硫金屬蛋白Elisa
黑綠青霉 三氟磺酸汞半胱蛋白3Elisa
茶褐斑盤多毛孢 (-)-假木賊堿尿微量白蛋白Elisa
熒光假單胞同型小種G 吖啶橙磷酸烯式酮酸羧激Elisa
東方伊薩酵母 (R)-(+)-1-[(R)-2-(2'-Di-3,5-xylylphosphinophenyl)f調(diào)停蛋白復合體亞基1重組蛋白Elisa
暗黑橄欖色鏈霉 色酮-2-甲酸糖還原Elisa
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
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