商品介紹:
測(cè)定意義: 糖類物質(zhì)是構(gòu)成植物體的重要組成成分之一,也是新陳代謝的主要原料和貯存物質(zhì)??偺鞘侵笜悠分械倪€原單糖及在本法測(cè)定條件下能水解成還原單糖的蔗糖、麥芽糖和可部分水解為葡萄糖的淀粉。 測(cè)定原理: 蒽酮比色法??捎糜诳扇苄詥翁恰⒐烟呛投嗵堑暮繙y(cè)定,具有靈敏度高﹑簡(jiǎn)便快捷﹑適用于微量樣品的測(cè)定等優(yōu)點(diǎn)。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、沸水浴、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、濃硫酸(不允許快遞)研缽、和蒸餾水。 |
商品屬性:
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測(cè)定管=A3-A4。
注意:空白管只需測(cè)定一次。
黑老虎(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Allocryptopine Klotho多肽蛋白抗體包裝100g
黑螞蟻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: LGD4033 鈣激活通道蛋白4抗體包裝25g
黑芝麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 5-Bromopyrimidine Kelch樣蛋白23抗體包裝5g
黑種草子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 17-DMAGBTB-kelch蛋白家族10抗體包裝1g
紅參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Soybean isoflavonesBTB-kelch蛋白家族4抗體包裝5g
紅參蘆(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 5-Bromoindole Kelch樣蛋白24抗體包裝1g
紅穿破石(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Ibrutinib,PCI-32765Kelch樣蛋白21抗體包裝25g
紅大戟(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: (R)-LansoprazoleKelch樣蛋白25抗體包裝5g
紅豆蔻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: (R)-Lansoprazole驅(qū)動(dòng)蛋白KNS1抗體包裝1g
紅杜仲(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Lenvatinib(E7080)驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員1B抗體包裝5g
紅花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: PR171 intermedaite I劍蛋白p80抗體包裝25g
紅花龍膽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Benzyl bromide 樣蛋白1抗體包裝5g
紅景天(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: PR171 intermedaite II組蛋白H3K9基轉(zhuǎn)移4抗體包裝1g
紅景天苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: (alphaS)-alpha-[(4-Morpholinylacetyl)amino]benzenebutanoyl-L-leucyl-L-phenylalanine離子通道蛋白家族成員3抗體包裝250mg
紅景天;草質(zhì)甙;英文名: Boc-HPh-Leu-Phe-Ome角蛋白82抗體包裝1g
鮑氏志賀菌Shigella│boydii 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品抗外切體復(fù)合物成分RRP45試劑盒根皮;Phloretin
溫和氣單胞菌Aeromonas│sobria 質(zhì)量規(guī)格:>98.5(C8H9N3O4干品),BR,可用于培養(yǎng)抗外切體成分10試劑盒喹;Gliquidone
: P-1資源名稱: 巴氏葡萄球菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體試劑盒齊特;Gliclazide
植物可溶性糖含量測(cè)試盒100管/96樣皮狀絲孢酵母 2-溴乙基芐酯直鏈淀粉Elisa
西藏木霉 3-甲苯并噻吩支鏈淀粉Elisa
科羅多擬無枝酸 去甲托品硝酸還原糖Elisa
粒狀青霉 噻吩-2-羧酸甲酯γ-谷氨酰環(huán)化轉(zhuǎn)移Elisa
木耳 2,6-雙(甲氧羰基)-4-吡啶程序性死亡分子-1Elisa
側(cè)孢短芽孢桿 鹽酸西律草膦乙酰轉(zhuǎn)移Elisa
枯草芽孢桿枯草亞種 3-異基苯苯Elisa
灰葡萄孢(灰霉?。?/span> 2-硝基-3-甲苯苯Elisa
卷枝毛霉詹森變型 3-氨基-5-吡唑絲;蘇蛋白磷酸Elisa
矮小青霉 鹽酸達(dá)克羅寧鳥苷酸激Elisa
墻壁圣格奧爾根 4-嗎啉淀粉磷酸化Elisa
寬鱗大孔 L-酪芐酯對(duì)甲苯磺酸鹽Atxin-3蛋白Elisa
異常威克漢姆酵母 1,4-二氫-2-甲巰基-4-氧代-5-嘧啶甲酸乙酯磷脂酰乙-N-甲基轉(zhuǎn)移Elisa
紫芝 4-溴芐磺酰5羥色Elisa
枯草芽孢桿 2,6-二肉桂酸乙酰Elisa
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。