商品介紹:
測(cè)定意義 木質(zhì)素過(guò)氧化物酶(EC1.11.1.14)是一種含亞鐵血紅素的過(guò)氧化物酶,屬于木質(zhì)素降解酶系,在木質(zhì)素生物降解、造紙工業(yè)、紡織工業(yè)、芳香化合物轉(zhuǎn)化與降解及環(huán)境污染控制等方面具有較大的應(yīng)用潛力。 測(cè)定原理 木質(zhì)素過(guò)氧化物酶催化天青脫甲基,在651nm處測(cè)定吸光值減少。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、研缽、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿。 |
商品屬性:
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測(cè)定管=A3-A4。
注意:空白管只需測(cè)定一次。
釀酒酵母卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體Human Acetylated HB(Acetylated Hemoglobin) ELISA Kit人血紅蛋白C(HbC)免疫試劑盒
白色短波單胞菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白114抗體Human ProSAAS/PCSK1N(granin-like neuroendocrine peptide) ELISA Kit人血紅蛋白(Hb)免疫試劑盒
挪威畢赤酵母卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白39抗體Human GGH(Gamma-glutamyl hydrolase) ELISA Kit人血管抑/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)免疫試劑盒
華根霉卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白34抗體Human P2RY2(P2Y purinoceptor 2) ELISA Kit人血管性血友病因子裂解(ADAMTS-13/vWF-cp)免疫試劑盒
黃曲霉卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白75抗體Human FPGS(Folylpolyglutamate synthase) ELISA Kit人血管舒緩激肽(BK)免疫試劑盒
香菇卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白65抗體Human OT(Oxytocin) ELISA Kit人血管生成抑制因子(Arresten)免疫試劑盒
釀酒酵母卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白157抗體Human RFC1(Reduced Folate Carrier 1) ELISA Kit人血管生成樣蛋白4(ANGPTL4)免疫試劑盒
松針散斑殼卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白90B抗體Human TXB2(Thromboxane B2) ELISA Kit人血管生成樣蛋白3(ANGPTL3)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白144A抗體Human KYN(Kynurenine) ELISA Kit人血管生成4(ANG-4)免疫試劑盒
深紅酵母卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白104抗體Human FPGS(Folylpolyglutamate synthase) ELISA Kit人血管生成2(ANG-2)免疫試劑盒
微白類諾氏菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體Human TXB2(Thromboxane B2) ELISA Kit人血管生成1(ANG-1)免疫試劑盒
凱斯特鞘單胞菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白67抗體Human OT(Oxytocin) ELISA Kit人血管生長(zhǎng)(ANG)免疫試劑盒
尖角凸臍蠕孢卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白129抗體Human KYN(Kynurenine) ELISA Kit人血管內(nèi)皮抑抗體(ES-Ab)免疫試劑盒
薔薇生鏈格孢卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白107抗體Human RFC1(Reduced Folate Carrier 1) ELISA Kit人血管內(nèi)皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)免疫試劑盒
假單胞菌屬卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白18抗體Human Acetylated p53(Acetylated p53) ELISA Kit人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)免疫試劑盒
Microterricola viridarii卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白56抗體Human Cleaved CASP9(Cleaved Caspase-9) ELISA Kit人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)免疫試劑盒
猴頭菌(猴頭蘑、刺猬菌)Hericium│erinaceus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRE鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白試劑盒槲皮-3-O-β-D-葡糖糖-7-O-
: 195-75資源名稱: O1群霍亂弧菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRES1蛋白同系物,線粒體試劑盒胡薄荷
解脂假絲酵母Candida│lipolytica 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BREphrin-B2試劑盒紅花八角
木質(zhì)素過(guò)氧化物酶(LiP)測(cè)試盒50管/48樣Prauserella L-3-(2-萘基)-血管生成2Elisa
蠟狀芽孢桿 碳酸銣血管生成受體酪激1Elisa
貝倫格葡萄座腔梨生?;?/span> 2,3-二甲吡啶血管生成受體酪激2Elisa
少根根霉 4,4'-雙(N-咔唑)-1,1'-聯(lián)苯血管生成樣蛋白2Elisa
欽海特德沃斯氏 雙[2-(2-苯并噻唑基)]鋅血管生成樣蛋白3Elisa
谷棒桿 2-羥基苯乙酮血管性血友病因子Elisa
包圍漆斑 3,3,5-三-L-甲狀腺原血管抑;血管穩(wěn)定蛋白Elisa
巨大球?qū)?/span> N-乙酰-DL-谷血紅蛋白Elisa
康氏假單胞 3-羥基-4-血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物Elisa
硬水黃桿 2-(2-氨基苯基)-1H-苯并咪唑血紅氧合1Elisa
不動(dòng)桿 4-溴-4',4''-二甲基三苯血紅氧合2Elisa
動(dòng)物雙歧桿乳亞種 7-羥基喹啉血Elisa
黃硬皮馬勃 3-羥基喹啉血漿α顆粒膜蛋白Elisa
豬布魯氏 6-羥基喹啉血漿前激肽釋放Elisa
固氮 寡霉A血鈉Elisa
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。