公司產(chǎn)品僅供科研使用:
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義: 二氫黃酮醇還原酶是類黃酮合成途徑中的一個(gè)關(guān)鍵酶,在決定植物的花色、葉色、果色和其他經(jīng)濟(jì)器官的色澤及其營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)方面起著重要作用。 測(cè)定原理: 二氫黃酮醇還原酶作用于二氫槲皮素產(chǎn)生兒茶素,可與香草醛縮合形成紅色化合物,在500nm處有特征吸收峰。 需自備的儀器和用品: 研缽、低溫離心機(jī)、震蕩儀、氮吹儀、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、水浴鍋、無(wú)水乙醇、乙酸乙酯。 |
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
埃博霉B;帕土匹龍英文名: Amikacin Sulfate CERD4蛋白抗體包裝250mg
埃博霉C英文名: Amikacin Sulfate CES1P1蛋白抗體包裝5MG
埃博霉D英文名: Amphotericin B羧酯2抗體包裝1g
埃羅替尼英文名: Amphotericin B羧酯3抗體包裝5g
艾力替尼磺鹽(AST1306)英文名: Angiotensin Acetate羧酯4A抗體包裝25g
磷(三)英文名: Anastrozole羧酯6抗體包裝100g
魯米特英文名: AnastrozoleCezanne蛋白抗體包裝25g
奧帕尼英文名: Apramycin sulfate內(nèi)臟移位線管蛋白CFC1蛋白抗體包裝5g
奧沙鉑英文名: Apramycin sulfate補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白2抗體包裝10ml
巴丁 III英文名: Arbidol HCl補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白4抗體包裝1g
白藜蘆英文名: Arbidol HCl補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白5抗體包裝25g
白消安英文名: Argatroban7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框28A抗體包裝5g
蓓薩羅丁;貝沙羅英文名: ArgatrobanCpG結(jié)合蛋白抗體包裝1g
丁氮芥英文名: Argipressin AcetateCGG結(jié)合蛋白1抗體包裝25g
?;宙邏A(PKC-412)英文名: AtenololcGMP依賴性蛋白激2抗體包裝5g
匍枝根霉Rhizopus│stolonifer (Ehrenb.) Vuill. 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定胰淀試劑盒隱綠原;Cryptochlorogen
澳型核果褐腐病菌Monilinia│fructicola (G. Winter) Honey 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR胰淀粉試劑盒氧化槐果堿 ;Oxysophocarpi
紅緣擬層孔菌Fomitopsis│pinicola (Sw.) P. Karst. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品胰島抗原2抗體/蛋白酪磷抗體試劑盒鹽益母草堿;Leonurine hyd
二氫黃酮醇還原酶(DFR)測(cè)試盒100管/48樣孔狀短小莖點(diǎn)霉 5--3-羧酸氧化低密度脂蛋白IgM抗體Elisa
枯草芽孢桿 阿替唑鞘脂Elisa
申氏不動(dòng)桿* 2-溴-5-(易)全式鈷氨2Elisa
單色下皮黑孔 2--6-氟三氟甲苯微管相關(guān)蛋白輕鏈3IElisa
海欖雌小單孢 8-溴血管內(nèi)皮粘附分子Elisa
致密曲霉 3--2,4-二羥基吡啶谷受體2A抗體Elisa
植物乳桿 3-氨基-5-氟苯甲酰蛋白酪磷酸抗體Elisa
云南紅球 超干化鐿(III) (REO)胰島抗體Elisa
動(dòng)球 4-乙基-3-甲酸(易)6酮前列腺F1aElisa
新城疫病 2-氟-5-羥基苯甲孕Elisa
嗜鹽堿球 4-(溴甲基)--甲氧基苯可溶性甘露糖受體Elisa
紫萁小菇 1-(2-羰基苯)吡咯CD13分子Elisa
彎孢 5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-2'-甲氧基尿苷11β羥基類固脫氫2Elisa
Curvularia cocis Matsush. 六水高酸鎘法尼基轉(zhuǎn)移βElisa
謝瓦曲霉 4-基-2-甲酸甲酯酪激BElisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。