商品介紹:
商品介紹 測定意義: 生物體內(nèi)巰基主要包括gu胱甘肽巰基和蛋白質(zhì)巰基。前者不僅能夠修復(fù)氧化損傷的蛋白質(zhì),而且參與活性氧清除,后者對于維持蛋白質(zhì)構(gòu)象具有重要作用。通過測定總巰基含量和GSH含量,能夠間接測定蛋白質(zhì)巰基含量。 測定原理: 巰基基團(tuán)與5,5’-二硫代-雙-硝基苯甲酸(DTNB)反應(yīng),生成黃色化合物,在412nm處有最大吸收峰。 自備實(shí)驗(yàn)用品: 天平、研缽、恒溫水浴鍋、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:雙試劑,直接操作,快速、簡便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺上,以便 不時(shí)觀察,待對照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
Sestrin3蛋白(SESN3)英文名:SESN3 ELISA Kit6號染色體開放閱讀框15抗體包裝1g
Sestrin2蛋白(SESN2)英文名:SESN2 ELISA Kit載脂蛋白A1抗體包裝250mg
Sestrin1蛋白(SESN1)英文名:SESN1 ELISA Kit抑癌基因p14抗體包裝100g
S100鈣結(jié)合蛋白B(S100B)英文名:S100B ELISA Kit抑癌基因p16抗體包裝25g
S100鈣結(jié)合蛋白A9(S100A9)英文名:S100A9 ELISA KitP27抗體/周期依賴激抑制劑包裝500g
S100鈣結(jié)合蛋白A8(S100A8)英文名:S100A8 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框171抗體包裝10MG
S100鈣結(jié)合蛋白A7(S100A7)英文名:S100A7 ELISA Kit20號染色體開放閱讀框177抗體包裝1g
S100鈣結(jié)合蛋白A6(S100A6)英文名:S100A6 ELISA KitCD244抗體包裝100g
S100鈣結(jié)合蛋白A4(S100A4)英文名:S100A4 ELISA Kit巨噬炎性蛋白1α抗體包裝25g
S100鈣結(jié)合蛋白A11(S100A11)英文名:S100A11 ELISA Kit巨噬炎性蛋白19抗體包裝5g
S100鈣結(jié)合蛋白A10(S100A10)英文名:S100A10 ELISA Kit色P450 3A4抗體包裝100g
S100鈣結(jié)合蛋白(S100)英文名:S100 ELISA Kit角蛋白6抗體包裝25g
R-型電壓依賴鈣離子通道α1E亞基(CACNα1E)英文名:CACNα1E ELISA Kit角蛋白7抗體包裝5g
R-脊椎蛋白1(RSPO1)英文名:RSPO1 ELISA Kit磷化角蛋白17抗體包裝100g
Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2(RUNX2)英文名:RUNX2 ELISA Kit卷曲螺旋域蛋白質(zhì)85C抗體包裝25g
鐮孢屬Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品異鎖鏈試劑盒3-乙南楝屬二酯;Cabralea
多粘類芽胞桿菌Paenibacillus│polymyxa 質(zhì)量規(guī)格:>98%異檸檬脫氫試劑盒乙?;湮恫?A;Acetyldi
發(fā)酵放線纖絲菌Actinotalea│fermentans 質(zhì)量規(guī)格:>96%異常凝血原試劑盒羽扇烯;Lupenone
總巰基測試盒100管/48樣白地霉 氧化型生激表達(dá)基因2蛋白Elisa
米洛斯線芽孢桿 [1,3-雙[2,6-二異基苯基]-2-咪唑烷亞基]二[[2-(異氧基)-5-[(2,2,2-Artemin蛋白Elisa
停乳鏈球 3-(噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-羧酸乙酯5羥色2B受體Elisa
Mesorhizobium silamurunense 2-溴-3,5-二苯胰高血糖樣肽Elisa
榮州農(nóng)研所絲桿 N-乙酰-5'-O-[二(4-甲氧基苯基)苯甲基]-2'-O-[(1,1-二甲基乙基)二甲基硅]-胞微囊藻Elisa
痢疾志賀氏51105 二羰基環(huán)戊二烯鈷III型原膠原N端前肽Elisa
大腸桿 4'-甲基-[1,1'-聯(lián)苯]-4-肝脂肪酸結(jié)合蛋白Elisa
空腸彎曲桿 3-苯基苯甲D-乳酸脫氫Elisa
干草鞘氨單胞 2-溴-2',5'-二甲氧基苯乙酮L-乳酸脫氫Elisa
短裙竹蓀 4-溴-3-甲氧基苯抗酪肌酸受體抗體Elisa
嗜熱脂肪地芽孢桿 2--5-氟甲酯流感病AElisa
Roseivivax lentus 偏鎢酸硫甲基轉(zhuǎn)移Elisa
栗疫 4-氨基-1-甲酸芐酯抗連接抗體Elisa
假芝 反式-2,4-二苯乙烯酸CD19抗體Elisa
華盛頓腥擲孢 硅化鈷 (metals basis)維生D25Elisa