ACC儲(chǔ)存液

ACC儲(chǔ)存液公司正在銷售的產(chǎn)品：兔蛋白聚糖(PG)試劑盒Anti-CTCF Antibody磷酸化原癌基因c-Met相關(guān)酪氨酸激酶抗體
兔絨毛蛋白(CVL/EZR)試劑盒 Anti-CTBP2 Antibody磷酸化急性髓白血病1蛋白抗體
兔白介素2(IL-2)試劑盒Anti-CTH AntibodyDNA修復(fù)蛋白R(shí)ad23抗體
兔甘露糖凝集素受體(MBLR)試劑盒 Anti-CTLA4 Anti

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類：培養(yǎng)基

儲(chǔ)存條件  4℃,6個(gè)月

用途  DF培養(yǎng)基常與ACC儲(chǔ)存液(90mmol/L)聯(lián)合使用，即ACC加入DF培養(yǎng)基稱為ADF培養(yǎng)基，用于分析細(xì)菌的ACC脫氨酶特性，菌株置于ADF培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)要好于DF培養(yǎng)基，說(shuō)明該菌株能夠以ACC為氮源進(jìn)行生長(zhǎng)，即該菌株能夠產(chǎn)生ACC脫氨酶。

注意事項(xiàng)  無(wú)菌溶液。主要由ACC(又稱1-氨基羰酰-1-環(huán)丙烷羧酸)、去離子水組成，經(jīng)過(guò)濾除菌

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

腭/肺/鼻上皮癌關(guān)聯(lián)蛋白(PLUNC)PLUNC ELISA Kit19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框80抗體包裝100g

多效生長(zhǎng)因子(PTN)PTN ELISA Kit半胱雙加氧1抗體包裝25g

多配體蛋白聚糖1(SDC1)SDC1 ELISA Kit膠原蛋白11A2抗體包裝5g

多聚免疫球蛋白受體(PIGR)PIGR ELISA KitCUL4B蛋白抗體包裝1g

多聚蛋白2(MMRN2)MMRN2 ELISA Kit1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框103抗體包裝5g

多功能肽2(LMP2)LMP2 ELISA Kit凋亡抑制因子2抗體包裝25g

多功能蛋白聚糖(VS)VS ELISA Kit促腎上腺皮質(zhì)激釋放激結(jié)合蛋白抗體包裝5g

多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)DAT ELISA Kit3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框23抗體包裝1g

多巴胺受體D4(DRD4)DRD4 ELISA Kit瓜環(huán)肽抗體包裝25g

多巴胺受體D3(DRD3)DRD3 ELISA Kit分裂核仁蛋白1抗體包裝5g

多巴胺受體D1(DRD1)DRD1 ELISA Kit鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激4抗體包裝1g

多胺氧化(PAOX)PAOX ELISA Kit磷化鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激4抗體包裝25g

對(duì)氧磷2(PON2)PON2 ELISA Kit膠原蛋白4a2亞基抗體包裝5g

對(duì)氧磷1(PON1)PON1 ELISA KitCD161c抗體包裝100g

端粒關(guān)聯(lián)蛋白1(TEP1)TEP1 ELISA Kit補(bǔ)體C1r鏈多肽抗體包裝25g

根瘤菌(紫云英)Mesorhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品孕激/孕試劑盒野馬追內(nèi)酯A;Eupalinolide

: ivcas7.01221資源名稱: 蕈狀芽胞桿菌 質(zhì)量規(guī)格：>97%,進(jìn)分sigma貨號(hào)A3656 鑰孔蟲(chóng)戚血藍(lán)蛋白試劑盒乙氧基白屈菜紅堿; 5-Ethoxych

: 65092442資源名稱: 羊布氏菌 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR鑰孔蟲(chóng)戚血藍(lán)蛋白試劑盒異夏佛塔苷;Isoschaftoside
ACC儲(chǔ)存液IKB Beta/FITC  熒光標(biāo)記KB抑制蛋白βIgG美托洛爾

phospho-IkB beta (Ser23)/FITC  熒光標(biāo)記化KB抑制蛋白βIgG美托洛爾 98%

IL-1 Alpha /FITC  熒光標(biāo)記白介1αIgG蛇根 ，≥99.5%

IL-1 Beta/FITC  熒光標(biāo)記白介1βIgG ≥99.0% (HPLC)

IL-1ra/FITC  熒光標(biāo)記白介-1受體拮抗劑IgG大豆油 試劑級(jí)

IL-1RA (Interleukin-1 receptor antagonist) /FITC  熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、豬、牛、羊、犬白介-1受體拮抗劑IgG大豆油 藥用級(jí)

IL-1R I /FITC  熒光標(biāo)記白介1受體ⅠIgG間溴苯 98%

IL-1R II /FITC  熒光標(biāo)記白介1受體ⅡIgG雙酮 CP,96%

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。