商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義植酸酶(phytase)是催化植酸及其鹽類水解為肌醇與磷酸(鹽)的一類酶的總稱,屬磷酸單酯水解酶,它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉(zhuǎn)化為可供有機(jī)體利用的有效磷,降低糞便中的磷含量,減輕對(duì)環(huán)境的污染,改善營養(yǎng)成分的吸收和利用,因此具有極其廣泛的研究和應(yīng)用價(jià)值。測(cè)定原理植酸酶在一定溫度和pH值條件下,水解底物植酸鈉生成無機(jī)磷與肌醇衍生物,無機(jī)磷在酸性環(huán)境中與鉬酸銨顯色劑反應(yīng)生成藍(lán)色復(fù)合物,在700nm處有特征吸收峰,根據(jù)700nm處吸光值變化可計(jì)算得植酸酶活性。自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋,甲苯(不允許快遞)。 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:雙試劑,直接操作,快速、簡便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
粉被馬婭霉幾丁質(zhì)3樣蛋白3抗體Human EFHD1 ELISA Kit兔尿激型纖溶原激活物(uPA)免疫試劑盒
副豬嗜血桿菌趨化樣因子超家族成員2抗體Human EIF3C ELISA Kit兔內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS)免疫試劑盒
貝倫格葡萄座腔菌趨化樣因子超家族成員2亞型1抗體Human EFTUD1 ELISA Kit兔末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)免疫試劑盒
芽孢桿菌18號(hào)染色體開放閱讀框1抗體Human EFS ELISA Kit兔淋巴功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)免疫試劑盒
檸檬桿菌色c氧化VIIA亞型2抗體Human EFTUD2 ELISA Kit兔粒集落激因子(G-CSF)免疫試劑盒
黃曲霉鈣離子通道a1F亞型抗體Human EFHA1 ELISA Kit兔可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)免疫試劑盒
黃粘蓋牛肝菌鈣調(diào)磷B亞基B1抗體Human EFHC1 ELISA Kit兔抗糖蛋白抗體(GP)免疫試劑盒
宇佐曲霉鈣調(diào)蛋白激激α抗體CaMKKαHuman EIF1 ELISA Kit兔抗平滑肌抗體(ASMA) 免疫試劑盒
彎孢菌環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白H抗體Human EFHD1 ELISA Kit兔抗凝血III(SERPINC1)免疫試劑盒
雜色曲霉磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激1抗體Human EFS ELISA Kit兔抗腦組織抗體(ABAb)免疫試劑盒
肺形側(cè)耳鈣激活蛋白12抗體Human Eg5 ELISA Kit兔抗內(nèi)皮抗體(AECA)免疫試劑盒
Au141(黑木耳)20號(hào)染色體開放閱讀框134抗體Human EFTUD2 ELISA Kit兔抗單核抗體(AMA)免疫試劑盒
廣食黃桿菌B粘附分子CD239抗體Human EHBP1 ELISA Kit兔膠原吡啶交聯(lián)(PYD)免疫試劑盒
聚生殼菌胰羧肽B2抗體Human EHD1 ELISA Kit兔降鈣原(PCT)免疫試劑盒
草假單胞菌視網(wǎng)膜色變性蛋白26抗體Human EFTUD1 ELISA Kit兔降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)免疫試劑盒
松口蘑過氧化物體肉堿?;D(zhuǎn)移抗體Human EFHA1 ELISA Kit兔甲狀旁腺激(PTH)免疫試劑盒
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質(zhì)量規(guī)格:Al2O3>90%,BCS100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B試劑盒律草
凝結(jié)芽孢桿菌Bacillus│coagulans 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRS100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A試劑盒龍膽
青霉Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià):>900 u/mgS100鈣結(jié)合蛋白A8/A9復(fù)合物試劑盒藜蘆
土壤植酸酶測(cè)試盒50管/24樣薩氏艾耳球蟲 亞氨基二乙酸二乙酯基質(zhì)衍生因子1αElisa
平臍蠕孢 2-溴-4,5-二甲氧基基質(zhì)衍生因子1βElisa
樟疫霉 4-苯酮激動(dòng)異構(gòu);分裂MBElisa
彩色豆馬勃 N,N-二正酰激活T-核因子1Elisa
蘇云金芽孢桿 1-環(huán)基-4-酮激活A(yù)Elisa
六孢毛殼 3-基甲酸酯敏感性脂肪Elisa
鹽堿球 2--5-甲氧基激肽釋放1Elisa
榮州假黃單胞 6-羥基-1-茚酮低密度脂蛋白Elisa
鹽生鹽古桿 2--5-氟嘧啶低密度脂蛋白膽固Elisa
橙磷傘 5-溴-2-氟嘧啶己糖激Elisa
釀酒酵母 己二酸單甲酯己糖激2Elisa
根瘤 4--2-甲基-6-喋呤Elisa
石頭農(nóng)霉 5-溴-4-氟-2-甲基化CpG結(jié)合蛋白2Elisa
豐盛毛霉 D-精鹽酸鹽甲殼質(zhì)蛋白40Elisa
埃里鏈格孢 1,3-二溴-5-氟-2-苯甲硫亞砜還原B1Elisa