詳細介紹
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
紫外分光光度法 | 10管/9樣 | AS632124 |
商品介紹:
商品介紹 測定意義 細胞內(nèi)脂質(zhì)的積累是脂質(zhì)合成與分解失衡的結(jié)果。脂肪酸合成增多,而氧化分解降低,會導致細胞內(nèi)脂質(zhì)積累。FAS是脂肪酸合成關(guān)鍵酶,催化乙酰fu酶A和丙二酰fu酶A而生成長鏈脂肪酸。FAS普遍表達于各種組織細胞中,在哺乳動物肝、腎、腦、肺和乳腺以及脂肪組織中表達豐富。 測定原理 以NADPH為還原力,F(xiàn)AS催化乙酰CoA和丙二酰CoA生成長鏈脂肪酸;通過測定NADPH的減少量,即可推算出FAS活性。 實驗中所需儀器和用品 研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計、1mL石英比色皿、可調(diào)式移液槍和雙蒸水。 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細菌、細胞或組織樣品的制備: 細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
產(chǎn)品優(yōu)點如下:
1、快速簡便:雙試劑,直接操作,快速、簡便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗: X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。且特異性強,不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結(jié)合物后,應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
大內(nèi)皮(Big ET)英文名:Big ET ELISA Kit溶血磷脂?;D(zhuǎn)移D抗體包裝1g
大動脈平滑肌肌動蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)英文名:Acta2/Actsa/Actvs ELISA Kit載脂蛋白E3抗體包裝250mg
催乳抑制激(PIH)英文名:PIH ELISA KitABI基因家族2抗體包裝1g
催乳釋放激(PRH)英文名:PRH ELISA Kit氧化蛋白質(zhì)解包裝5g
催乳(PRL)英文名:PRL ELISA Kit鐵調(diào)節(jié)蛋白2抗體包裝500mg
催產(chǎn)(OT)英文名:OT ELISA Kit乙脫氫1型抗體包裝50mg
促有絲分裂因子(MF/MPF)英文名:MF/MPF ELISA KitAFP4a蛋白抗體包裝1g
促性腺激釋放激(GnRH)英文名:GnRH ELISA KitRho GTP激活蛋白32抗體包裝250mg
促生長激釋放激(GHRH)英文名:GHRH ELISA Kit能量平衡相關(guān)蛋白抗體包裝5g
促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子(CRF)英文名:CRF ELISA Kit禽腦脊髓炎病AEV抗體包裝5mg
促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)英文名:ACTH ELISA Kit腺苷環(huán)化7抗體包裝25g
促腎上皮質(zhì)激釋放激(CRH)英文名:CRH ELISA Kit腺苷環(huán)化4抗體包裝5g
促卵泡(FSH)英文名:FSH ELISA Kit腺苷活化蛋白激γ1抗體包裝1g
促狀腺釋放激(TRH)英文名:TRH ELISA Kit芳香N-乙?;D(zhuǎn)移抗體包裝1g
促狀腺(TSH)英文名:TSH ELISA Kit腺苷環(huán)化8抗體包裝1g
三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員2抗體結(jié)締組織生長因子(CTGF)AR-A014418 is an ATP-competitive, and selective GSK3β inhibitor with IC50 and Ki
脂肪酸合成酶(FAS)測試盒10管/9樣丁香假單胞 4-羥基-6-喹唑啉基質(zhì)金屬蛋白8Elisa
異常威克漢姆酵母 6--4-羥基喹唑啉基質(zhì)金屬蛋白9Elisa
假交替單胞屬 2-甲氧基-3-硝基-4-基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1Elisa
棲土曲霉 1-乙酰-4-基質(zhì)金屬蛋白抑制因子2Elisa
蜥蜴纖細芽孢桿 2-(1H-吡唑-1-基)乙酸基質(zhì)金屬蛋白抑制因子3Elisa
釀酒酵母 5--6-甲基基質(zhì)裂解蛋白;基質(zhì)溶Elisa
*櫻桃鏈格孢 1-(3-甲氧基苯基)哌基質(zhì)裂解Elisa
金龜子綠僵 N,N-二甲基1,4-丁烷二基質(zhì)衍生因子1Elisa
釀酒酵母 4-甲基-2-戊基-1,3-二氧戊環(huán)基質(zhì)衍生因子1αElisa
Sphingobium rhizovicinum 2--5-甲氧基苯并咪唑基質(zhì)衍生因子1βElisa
大腸埃希氏 3,4-二甲氧基甲酯基質(zhì)相互作用分子1Elisa
小孢擬盤多毛孢 N-Boc-4-亞甲基激活AElisa
盤長孢狀盤孢 2'-F-Ac-dC亞磷酰單體敏感性脂肪Elisa
玫煙色棒束孢 N-乙?;?5'-O-[雙(4-甲氧基苯基)苯基]-2'-脫氧-2'-氟胞苷激肽釋放10Elisa
豬鏈球分型血清參考品 血清型 SS3 3-氟-2-激肽釋放11Elisa
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。