詳細介紹
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
亞硫酸氫鈉溶液 | 500ml | FS-R7162 |
產(chǎn)品分類:染色其他
儲存條件:室溫,12個月
用途:清洗切片中多余的染色
注意事項:主要由亞硫酸氫鈉、去離子水組成,注意密閉保存。
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
灰黃青霉DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體Human MSC(Musculin) ELISA Kit人B受體相關(guān)蛋白31(BCAP31)免疫試劑盒
谷棒桿菌磷化絲裂原活化蛋白激1/2抗體Human CENPU (Centromere protein U) ELISA KIT人B生長因子(BCGF)免疫試劑盒
釀酒酵母上皮粘附分子抗體Human MKL2 (MKL/myocardin-like protein 2) ELISA KIT人B淋巴瘤因子6(Bcl6)免疫試劑盒
香菇屬酪蛋白激受體B2抗體Human MOAP1 (Modulator of apoptosis 1) ELISA KIT人B淋巴瘤-XL(Bcl-xl)免疫試劑盒
少孢酵母表皮生長因子抗體Human MAZ (Myc-associated zinc finger protein) ELISA KIT人B連接蛋白(BLNK)免疫試劑盒
*雞油菌都不能訂購表皮生長因子受體3抗體Human MOB2 (MOB kinase activator 2) ELISA KIT人B活化因子受體(BAFF-R)免疫試劑盒
突臍蠕孢菌酪蛋白激A4受體抗體Human MDGA1 (MAM domain-containing glycosylphosphatidylinositol anchor protein 1) ELISA KIT人B活化因子(BAFF)免疫試劑盒
雀黃鏈霉菌上皮鈣粘附分子抗體Human MPHOSPH10 (U3 small nucleolar ribonucleoprotein protein MPP10) ELISA KIT人Bκ 輕肽基因增強子核因子抑制因子ε(NFKBIE)免疫試劑盒
鏈格孢紅生成受體抗體Human PRX(Periaxin) ELISA Kit人B群鏈球菌多糖抗體(IgG)免疫試劑盒
克魯斯假絲酵母腦啡肽抗體Human MKX(Homeobox protein Mohawk) ELISA Kit人B-淋巴趨化因子1(BLC-1/CXCL13)免疫試劑盒
楊齒白木層孔菌EID2蛋白抗體Human MARCO (Macrophage receptor MARCO) ELISA KIT人B淋巴抗原(CD20)免疫試劑盒
大腸桿菌上皮粘附分子抗體Human MST1R(Macrophage-stimulating protein receptor) ELISA Kit人blca-4 免疫試劑盒
淡紫擬青霉紅膜相關(guān)蛋白ERMAP抗體Human M6PR (Cation-dependent mannose-6-phosphate receptor) ELISA KIT人blca-1 免疫試劑盒
菜豆間座殼腺樣癌特異性相關(guān)抗原EMC1抗體Human SEMG1(Semenogelin-1) ELISA Kit人Bcl-2樣蛋白1(BCL2L1)免疫試劑盒
擬粉紅鎖擲孢酵母腺樣癌特異性相關(guān)抗原EMC1抗體Human MAD1L1(Mitotic arrest deficient 1-like protein 1) ELISA Kit人B7-H4 免疫試劑盒
斯氏梭菌硫軟骨蛋白多糖3抗體Human M6PR (Cation-dependent mannose-6-phosphate receptor) ELISA KIT人A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)免疫試劑盒
綠色木霉Trichoderma│viride 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=3%華蟾酥基
熒光假單胞菌生物型FPseudomonas│fluorescens biotype F 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品木蘭脂
多噬伯克霍爾德氏菌Burkholderia│multivorans 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.5%(GC)異飛薊賓
亞硫酸氫鈉溶液PA-IgM(Human Platelet associated antibody) ELISA Kit 人血小板相關(guān)IgM規(guī)格: 48T
FPA(Human fibrinopeptide A) ELISA Kit 人血纖肽/纖維蛋白肽A規(guī)格: 48T
Plg(Human Plasminogen) ELISA Kit 人纖溶mei原規(guī)格: 48T
CTLA-4/CD152(Human cytotoxic T lymphocyte associated antigen 4) ELISA Kit 人細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原4規(guī)格: 48T
Lambda -IgLC(Human lambda immunoglobulin light chain) ELISA Kit 輕鏈lambda規(guī)格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。