詳細介紹
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹:
測定意義 β-GD廣泛存在于動物組織中,是一種參與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移過程的基質(zhì)降解酶,具有水解固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖等生理功能。該酶在肝細胞中含量較高。此外在胃癌組織中含量豐富,測定胃液β-GD活性對于研究胃癌具有重要的意義。 測定原理 β-GD催化ben酚 β-D-葡萄糖醛酸產(chǎn)生游離的ben酚,通過測定ben酚含量反應(yīng)該酶活性高低。 需自備的儀器和用品 可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321252 |
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
肉桂(標準品)英文名: Cephalotaxlen磷化肌球蛋白磷抗體包裝25g
肉桂(標準品)英文名: Araloside Ⅹ磷化肝生長因子受體(原癌基因)抗體包裝5g
肉桂(標準品)英文名: Glucosamine sulfate絲裂原活化蛋白激MKK6抗體包裝1g
肉桂(標準品)英文名: Coptisine Sulfate磷化絲裂原活化蛋白激MKK3/6抗體包裝25g
肉桂葉(標準品)英文名: Chondroitin sulfate磷化絲裂原活化蛋白激MKK6抗體包裝5g
乳香(標準品)英文名: Gentiopicroside嗜粒趨化蛋白22抗體包裝1g
瑞香/祖師麻(標準品)英文名: Aloin硫腦啡肽抗體包裝5g
塞骨(標準品)英文名: Aloin抗體包裝1g
噻二(標準品)英文名: Aloenin基質(zhì)金屬蛋白9抗體包裝25g
噻二苷(標準品)英文名: Gramine原癌基因M-ras抗體包裝5g
賽門苷I(標準品)英文名: Ruscogenin單核趨化蛋白1抗體包裝5g
三白草(標準品)英文名: Chlorogenic acid抗體包裝1g
三白草(標準品)英文名: Chlorogenic acid雞支原體抗體包裝5g
三叉苦(標準品)英文名: Nitidine chloride線粒體轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝1g
三尖杉堿(標準品)英文名: Cyanidin Chloride有絲分裂抑制缺陷蛋白1抗體包裝500mg
百日咳博德特氏菌Bordetella│pertussis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品抗蛋白3抗體IgG試劑盒對羥基肉桂;p-Hydroxy-cin
佩特曲霉Aspergillus│petrakii 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95.0%,BR抗單鏈DNA試劑盒蛋;L-Methionine
嗜肺巴氏桿菌Pasteurella│pneumotropica 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98.0%,標準品抗單核抗體試劑盒對傘花烴;4-Isopropyltolu
β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)測試盒50管/48樣樊慶生氏紅球 反式-4-乙基-(1,1-聯(lián)二環(huán)己烷)-4-甲酸二氧化Elisa
泛屬 4-甲基水楊酰二磷酸腺苷Elisa
釀酒酵母 7-溴喹啉二?;视虴lisa
發(fā)酵畢赤酵母 6-吡啶-3-羧酸乙酯繁殖與呼吸綜合征病抗體Elisa
海生紅球 4-基苯磺酰芳香化Elisa
pGEX-5X-3 4-溴-3-氟甲酯芳香烴受體Elisa
貝倫格葡萄座腔梨生?;?/span> 2,5-二氟芐酯化脂肪酸Elisa
Enterobacter ludwigii Hoffmann 3,4-二甲氧苯肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白AElisa
黃曲霉 3-硫脲肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白CElisa
婁徹鏈霉 2-氟-3-甲酰基苯酸肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白DElisa
海洋桿 4-乙基苯硫肺炎支原體抗體Elisa
糖多孢 4-吡咯并[2,3-D]嘧啶分泌型磷脂A2Elisa
地衣芽孢桿 2-乙基-3-羥基-4-吡喃酮分泌型球蛋白AElisa
博戈里亞假絲酵母 1H-1,2,4-三氮唑-3-羧酸分泌型球蛋白MElisa
變異鏈霉 噻噸-9-酮封閉蛋白1Elisa