試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹:
測(cè)定意義S-UE能夠水解尿素,產(chǎn)生氨和碳酸。土壤脲酶活性與土壤的微生物數(shù)量、有機(jī)物質(zhì)含量、全氮和速效氮含量呈正相關(guān)。土壤脲酶活性反應(yīng)了土壤的氮素狀況。測(cè)定原理利用靛酚藍(lán)比色法測(cè)定脲酶水解尿素產(chǎn)生的NH3-N。需自備的儀器和用品可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。 |
商品屬性:
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4。△A測(cè)定管=A3-A4。
注意:空白管只需測(cè)定一次。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。
馬來(lái)阿扎他啶英文名: LHRH (4-10)磷變位1抗體包裝1g
馬來(lái)尼敏英文名: Lymphocyte Activating Pentapeptide磷激1抗體包裝5g
馬來(lái)吡英文名: Melittin(Mellitin)羧化抗體包裝1g
馬來(lái)伏沙明英文名: Metamorphosin A脫氫復(fù)合物X蛋白抗體包裝5g
馬來(lái)那敏/撲爾敏英文名: Neo-Kyotorphin磷烯羧激抗體包裝100g
馬來(lái)溴那敏英文名: Neurokinin A (4-10)果糖-2,6-二磷1抗體包裝25g
嗎貝英文名: Neuropeptide W-30 (human)磷化6磷果糖激抗體包裝1g
芬諾英文名: Neuropeptide W-30 (rat)p21蛋白抗體包裝5g
索巴莫英文名: Neurotensin (1-8)P選擇糖蛋白配體1抗體包裝25g
孟魯司特鈉英文名: Neuropeptide Y (13-36)(porcine)絲蛋白2抗體包裝5g
米爾貝肟英文名: Neuropeptide Y (2-36) (human,rat)蛋白調(diào)解因子10抗體包裝10g
米貝英文名: Neuropeptide Y (22-36)香葉烯基轉(zhuǎn)移1β抗體包裝1g
米屈肼英文名: Neuropeptide Y (3-36)(porcine)淋巴胞漿蛋白LCP1抗體包裝100g
莫吉司坦英文名: Osteocalcin (7-19) (human)黑色瘤優(yōu)先表達(dá)抗原抗體包裝25g
奈福泮/鹽平痛新英文名: Osteogenic Growth Peptide原鈣粘蛋白γA6抗體包裝5g
: GIM2.142資源名稱: 斯達(dá)氏油脂酵母 質(zhì)量規(guī)格:>99%黑色瘤白藜蘆;Resveratrol
鹽八疊球菌Halosarcina│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品黑色白楊;Chrysin
金橙黃微小桿菌Exiguobacterium│aurantiactum 質(zhì)量規(guī)格:HPLC ≥98%,BR核因子κB抑制物激β試劑盒阿彼斯基姆;apiosylskimmi
土壤脲酶(SUE)測(cè)試盒50管/24樣植物乳桿 3-硝基-4-白介8Elisa
枯草芽孢桿 2-戊基維生B2Elisa
無(wú) 1-芐基-2-苯基咪唑αElisa
豇豆慢生根瘤 3-芐氧基P糖蛋白;滲透性糖蛋白Elisa
孢吸水鏈霉 3,5-吡唑羧酸二乙酯仙臺(tái)病抗體Elisa
黑曲霉 R-3-甲酸乙酯鹽酸鹽15脂加氧Elisa
大腸埃希氏 (1R,2S)-2-(3,4-二氟苯基)環(huán) (R)-扁桃酸鹽調(diào)節(jié)性TElisa
大腸埃希氏桿 3-吡咯烷酮鹽酸鹽氨基轉(zhuǎn)移Elisa
路氏乳桿 4--6-三氟甲基嘧啶谷草轉(zhuǎn)氨;天門冬氨基轉(zhuǎn)移Elisa
黃微綠鏈霉 5-溴-2-氟-6-血小板內(nèi)皮粘附因子Elisa
Micrococcus yunnanensis 4-癸基苯抗豬圓環(huán)2型病抗體Elisa
灰黃鏈霉 2,4-二羥基-6-尿型血漿原激活物Elisa
葉點(diǎn)霉 1-芐基-4-甲基哌鹽酸鹽百日咳Elisa
膠孢 2-甲基喹啉鹽酸鹽百日咳IgG抗體Elisa
Microbacterium terricola 4-甲酸苯基三氟酸超氧化物歧化2Elisa