公司產(chǎn)品僅供科研使用:
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義AGP (EC 2.7.7.21)主要存在于植物中,催化葡萄糖-1-磷酸與ATP反應(yīng)生成淀粉合成的直接前體ADPG,是植物淀粉生物合成的主要限速步驟。測(cè)定原理AGP催化的逆向反應(yīng)生成G1P,在反應(yīng)體系中添加的磷酸己糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH,340nm下測(cè)定NADPH增加速率,即可計(jì)算AGP活性。需自備的的儀器和用品紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水 |
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
25(S)-魯斯可皂苷元-1-O-α-L-吡喃鼠李糖基...英文名: Boc-Asp(OtBu)-OH組蛋白H4抗體包裝5g
25-脫澤瀉A;澤瀉G(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Boc-D-Pro-OH乙?;M蛋白H4抗體包裝1g
26-脫氧升麻苷英文名: Boc-Ser-OMe三基化組蛋白H3抗體包裝5g
28-O-順芷酰基匙羹藤新苷元英文名: N-BOC-O-Benzyl-L-serine二基化組蛋白H3抗體包裝1g
28-去基-β-香樹(shù)脂英文名: Boc-Thr-OH二基化組蛋白H3K4抗體包裝5g
28-去基-β-香樹(shù)脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Boc-L-Trp(For)-OH二基化組蛋白H3K9抗體包裝1g
2’-乙?;锘ㄌ擒?標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Boc-D-Tyr-OH三基化組蛋白H3抗體包裝5g
2"-O-沒(méi)食子?;鸾z桃苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Boc-Tyr-OMe乙?;M蛋白H3抗體包裝1g
3"-O-基表沒(méi)食子兒茶沒(méi)食子酯英文名: Boc-O-(2-bromo-Cbz)-L-Tyrosine乙酰化組蛋白H3抗體包裝250mg
3',4',5',5,7-五氧基黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Boc-O-tert-butyl-L-tyrosine磷化肝核因子4α抗體包裝5g
3',4',7-三羥基黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Boc-D-Val-OH高遷移率核小體結(jié)合蛋白1包裝1g
3'-氧基葛根英文名: Boc-Phg-OH磷化組蛋白H3抗體包裝100g
3'-牻牛兒基-3-異戊烯基-5,7,2',4'-四羥...英文名: BOC-L-Homophenylalanine組織相容性復(fù)合體α抗體包裝25g
3'-羥基葛根英文名: BOC-D-Serine methyl ester肝生長(zhǎng)因子激活抑制蛋白2抗體包裝1g
3'-羥基紫檀茋英文名: Boc-Arg(Pbf)-OHHOMER2抗體包裝25g
豌豆根瘤菌Rhizobium│leguminosarum 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng) 磷激1試劑盒基異茜草-1- ;Rubiadi
草青霉Penicillium│oxalicum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于培養(yǎng)磷肌3激試劑盒姜;Zingerone
東方擬無(wú)枝菌Amycolatopsis│orientalis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于培養(yǎng)磷化乙酰試劑盒基蓮心堿;Neferine
ADPG焦磷酸化酶(AGP)測(cè)試盒25管/24樣糞腸球 硫酸鎘環(huán)氧合1Elisa
阿孫鏈霉 化鎘環(huán)氧合2Elisa
同絲毛殼 化鎘 半(五水合物)核酮糖-1,5-二磷酸羧化;加氧Elisa
食品檢測(cè)用鼠傷寒沙門(mén)氏 化銥(IV)線粒體呼吸鏈復(fù)合物VElisa
解淀粉芽孢桿解淀粉亞種 化鈀黃酮合成Elisa
大麗輪枝孢 化銣氨基轉(zhuǎn)移Elisa
枯草芽孢桿 氟化鈣天門(mén)冬氨基轉(zhuǎn)移Elisa
雞白痢沙門(mén)氏 溴化鍶過(guò)氧還蛋白Elisa
放射桿狀根瘤 無(wú)水溴化鎂硫氧化還原蛋白Elisa
壺黑蛋巢布諾德變型 化銫NADP-蘋(píng)果酸脫氫Elisa
香菇 重鉻酸磷酸甘油脫氫Elisa
谷棒桿 硝酸鉻(III) 九水合物加氧Elisa
釀酒酵母 鉻酸鋰 二水合物脫鎂葉綠酸aElisa
黃曲霉 酸鋇 一水合物新黃質(zhì)Elisa
棲土曲霉 無(wú)水化鎂紫黃質(zhì)Elisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。