λ培養(yǎng)基

λ培養(yǎng)基公司正在銷售的產(chǎn)品：兔轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)試劑盒Anti-CNR1 AntibodyRap鳥嘌呤核苷酸交換因子(GEF)5抗體
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產(chǎn)品分類：培養(yǎng)基

儲存條件  4℃,6個月

用途  細菌培養(yǎng)

注意事項  無菌,經(jīng)高壓滅菌處理。主要由胰蛋白胨、氯化鈉、去離子水組成。

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

激活蛋白C(APC)APC ELISA Kit9號染色體開放閱讀框139抗體包裝1g

激活T-細胞核因子1(NFATC1)NFATC1 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框140抗體包裝5g

基質(zhì)細胞衍生因子4(SDF4)SDF4 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框142抗體包裝1g

基質(zhì)細胞衍生因子1(SDF1)SDF1 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框163抗體包裝5g

基質(zhì)金屬蛋白9(MMP9)MMP9 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框169抗體包裝25g

基質(zhì)金屬蛋白8(MMP8)MMP8 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框173抗體包裝5g

基質(zhì)金屬蛋白7(MMP7)MMP7 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框21抗體包裝100g

基質(zhì)金屬蛋白3(MMP3)MMP3 ELISA Kit磷化絲/蘇蛋白激II β/casein kinase IIβ抗體包裝25g

基質(zhì)金屬蛋白23B(MMP23B)MMP23B ELISA Kit癌胚抗原抗體包裝100g

基質(zhì)金屬蛋白2(MMP2)MMP2 ELISA Kit癌胚抗原抗體包裝25g

基質(zhì)金屬蛋白19(MMP19)MMP19 ELISA Kit粘附分子相關(guān)蛋白/癌基因下調(diào)蛋白抗體包裝500g

基質(zhì)金屬蛋白15(MMP15)MMP15 ELISA Kit淋巴抗原Ly6c抗體包裝25g

基質(zhì)金屬蛋白14(MMP14)MMP14 ELISA Kit周期E抗體包裝5g

基質(zhì)金屬蛋白13(MMP13)MMP13 ELISA Kit7號染色體開放閱讀框50抗體包裝25g

基質(zhì)金屬蛋白12(MMP12)MMP12 ELISA Kit7號染色體開放閱讀框53抗體包裝5g

JCM3025=CBS429.61=DSM43023=IFM1175=IFO13資源名稱: 白色鏈孢囊菌 質(zhì)量規(guī)格：>95%,EP,BR脂阿伯甘露聚糖試劑盒銀杏雙黃;ginkgetin

雅致小克銀漢霉Cunninghamella│elegans 質(zhì)量規(guī)格：效價測定整合連接激1試劑盒楊芽黃;Tectochrysin

葡萄座腔菌屬Botryosphaeria│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP34整合β4結(jié)合蛋白試劑盒魚藤;deguelin
λ培養(yǎng)基Histone H3/FITC  熒光標記抗組蛋白（AHA）IgGO113278-500ml  OP-乳化劑

Histone H3-like protein/FITC  熒光標記抗組蛋白H3樣(N端)IgG焦亞硫 AR，95.0%

Histone H3-like protein/FITC  熒光標記抗組蛋白H3樣（C端）IgG焦亞硫 CP，94.0%

Histone H3-like protein/FITC  熒光標記抗組蛋白H3樣（N端）IgG亞硫氫 AR

Phospho-Histone H3 (Ser)/FITC  熒光標記化組蛋白3IgG亞硫氫 CP

Phospho-Histone H3 (Ser28) /FITC  熒光標記化組蛋白3IgG硫銀 AR

Phospho-Histone H3 (Thr11)/FITC  熒光標記化組蛋白3IgG氟化氫鈉 98%

Phospho-Histone H3 (Thr3)/FITC  熒光標記化組蛋白3IgG銀  99.99% metals basis

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細胞類型，設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。