ADF培養(yǎng)基

ADF培養(yǎng)基公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：兔胱天蛋白酶12(Casp12)試劑盒 Anti-CTSD Antibody磷酸化周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體
兔促甲狀腺抗體(TSA)試劑盒Anti-CTSD Antibody(0020)磷酸化周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體
兔血管生成素樣蛋白1(ANGPTL1)試劑盒 Anti-CTSD Antibody(0019)磷酸化周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體
兔間隙連接蛋白40(CX40

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢(xún)并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類(lèi)：培養(yǎng)基

儲(chǔ)存條件  4℃,6個(gè)月

用途  DF培養(yǎng)基常與ADF培養(yǎng)基聯(lián)合使用，用于分析細(xì)菌的ACC脫氨酶特性，菌株置于ADF培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)要好于DF培養(yǎng)基，說(shuō)明該菌株能夠以ACC為氮源進(jìn)行生長(zhǎng)，即該菌株能夠產(chǎn)生ACC脫氨酶。

注意事項(xiàng)  無(wú)菌溶液。主要由磷酸鹽、葡萄糖、葡萄糖酸、檸檬酸等組成，并含有眾多微量元素如錳、銅、鐵、鋅等金屬離子等，經(jīng)無(wú)菌處理，該試劑含ACC(又稱(chēng)1-氨基羰酰-1-環(huán)丙烷羧酸)。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線(xiàn)，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

蛋白激活受體3(PAR3)PAR3 ELISA Kitα1-chimaerin蛋白抗體包裝25g

蛋白激活受體2(PAR2)PAR2 ELISA Kit信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白9復(fù)合體7b抗體包裝5g

蛋白3(PR3)PR3 ELISA Kit鈣調(diào)神經(jīng)磷調(diào)節(jié)蛋白1抗體（唐氏綜合征候選區(qū)域蛋白1樣蛋白1）包裝1g

蛋白磷3調(diào)節(jié)因子亞基1(PPP3R1)PPP3R1 ELISA Kit鈣調(diào)神經(jīng)磷調(diào)節(jié)蛋白3抗體（唐氏綜合征候選區(qū)域蛋白1樣蛋白3）包裝5g

蛋白酪磷受體O(PTPRO)PTPRO ELISA KitCentaurin α1抗體包裝1g

蛋白酪磷受體H(PTPRH)PTPRH ELISA KitB淋巴白血病/淋巴瘤11/鋅指蛋白856抗體包裝5g

蛋白激抑制因子γ(PKIγ)PKIγ ELISA KitB淋巴白血病/淋巴瘤11B抗體包裝25g

蛋白激抑制因子β(PKIβ)PKIβ ELISA Kit鈣平衡調(diào)節(jié)蛋白1抗體包裝5g

蛋白激N2(PKN2)PKN2 ELISA Kit阿爾茨海默病淀粉樣蛋白相關(guān)膠原蛋白抗體包裝100mg

蛋白激D1(PRKD1)PRKD1 ELISA Kit老年癡呆相關(guān)類(lèi)鈣粘蛋白CS1抗體包裝1g

蛋白激Cη(PKCη)PKCη ELISA Kit凋亡誘導(dǎo)蛋白NALP3抗體包裝25g

蛋白激Cζ(PKCζ)PKCζ ELISA Kit豬圓環(huán)?、蛐鸵職さ鞍卓贵w包裝5g

蛋白激Cε(PKCε)PKCε ELISA Kit血管加壓激活鈣啟動(dòng)受體蛋白1抗體包裝25g

蛋白激Cδ(PKCδ)PKCδ ELISA Kit干生長(zhǎng)因子受體/表面分化抗原抗體包裝5g

蛋白激Cα相互作用蛋白1(PICK1)PICK1 ELISA Kit離子通道蛋白6抗體包裝1g

根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：purity>99.0%,BR1試劑盒葉黃;Xanthophyll

粗壯假絲酵母Candida│valida 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品誘導(dǎo)型一氧化氮合成試劑盒愈創(chuàng)木;Guaiacol

: Charwoman資源名稱(chēng): 鏈球菌 質(zhì)量規(guī)格：含量>99.0%有絲分裂原活化蛋白激14試劑盒異丁香;Isoeugenol
ADF培養(yǎng)基IKI3 family protein/FITC  熒光標(biāo)記擬南芥IKI3IgG四氧化三鈷 99.9% metals basis

IKK gamma/FITC  熒光標(biāo)記核因子κB激gamma抑制劑IgGN,N-二環(huán)己 98%

IKK alpha/FITC  熒光標(biāo)記核因子κB激alpha抑制劑IgGN,N-二芐 CP,98.0%

IKK beta /FITC  熒光標(biāo)記核因子κB激beta抑制劑IgGN,N-二芐 99%

phospho-IKK gamma (Ser85) /FITC  熒光標(biāo)記化核因子κB激gamma抑制劑IgG用于蛋白測(cè)序分析, ≥99.5% (GC)

phospho-IKK gamma (Ser31) /FITC  熒光標(biāo)記化核因子κB激gamma抑制劑IgG油 CP

phospho-IKK alpha (Thr23) /FITC  熒光標(biāo)記化核因子κB激alpha抑制劑IgGN,N,N',N'',N''-五二烯三 99%

phospho-IKK gamma (Ser376)/FITC  熒光標(biāo)記化核因子κB激gamma抑制劑IgG苯汞 98%（劇品）

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線(xiàn)，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線(xiàn)的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（劑量反應(yīng)曲線(xiàn)）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。