詳細介紹
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹:
測定意義 脂蛋白酯酶是脂肪細胞、心肌細胞、骨骼肌細胞、乳腺細胞及巨噬細胞等實質細胞合成的一種酶,可催化甘油三脂水解為脂肪酸和單酸甘油酯,以供組織氧化供能和貯存,并在不同的組織表現(xiàn)出不同的生理意義。 測定原理 脂蛋白酯酶水解4-硝基苯棕櫚酸酯產(chǎn)生4-硝基苯酚,在400nm有特征吸收峰。 自備實驗用品及儀器 天平、冷凍離心機、研缽、水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板。 |
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 100管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321197 |
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑战M織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
(標準品)英文名: DL-LysineHHLA1蛋白抗體包裝250mg
香蜂草苷(標準品)英文名: DL-Arginine Hydrochloride心肌肌球蛋白重鏈抗體包裝1g
香附(標準品)英文名: L(-)-Carnitine 異質性核糖核蛋白M抗體包裝1g
香加皮(標準品)英文名: Levocarnitine;L(-)-Carnitine附睪分泌蛋白4抗體包裝5g
香荊芥(標準品)英文名: L-Glutamic acid monosodium salt hydrate鐵硫簇整合同源物2蛋白抗體包裝1g
香蒲新苷(標準品)英文名: L-Glutamine HIG1區(qū)域家族成員2A抗體包裝250mg
香薷(標準品)英文名: Glutathione (Reduced);GSH結合珠蛋白/觸珠蛋白抗體包裝25g
香葉木-7-O-葡萄糖苷(標準品)英文名: Glutathione (Reduced)高遷移率族蛋白B4抗體包裝5g
香葉木(標準品)英文名: Glutathione(Oxidized)硫肝糖蛋白1抗體抗體包裝1g
香櫞(枸櫞)(標準品)英文名: DL-Isoleucine叉頭蛋白J1抗體包裝5g
香櫞(標準品)英文名: H-Lys-OH.HCl艾滋病病抗體包裝25g
香紫蘇(標準品)英文名: L-Ornithine monohydrochloride艾滋病病抗體包裝5g
香紫蘇內(nèi)酯(標準品)英文名: L-Aspartic acid艾滋病病抗體包裝1g
襄五脂英文名: L-Aspartic acid結合珠蛋白相關蛋白抗體包裝5g
(標準品)英文名: L-Cysteine hydrochloride,anhydrousL-組脫羧抗體包裝100mg
鏈霉菌屬Streptomyces│sp. 質量規(guī)格:>99%,BR糜蛋白綠原;Chlorogenic acid
孟氏假單胞菌Pseudomonas│mandelii 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品錳超氧化物歧化試劑盒羅漢果苷ⅴ;Mogroside V
球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 質量規(guī)格:>99%,BR鎂依賴性磷1試劑盒龍膽苦苷;Gentiopicroside
脂蛋白酯酶(LPL)測試盒100管/48樣吉氏根瘤 2-氟酸蛋白激AElisa
微球屬 3,5-二-2,4-二氟苯蛋白激G-II型Elisa
小托柄鵝膏 1-甲基-1,2,4-三唑絲蛋白HTRA1Elisa
阿魏側耳 氨噻肟酸乙酯組織谷氨酰轉移Elisa
大腸桿 2,3-二甲基H3N2流感Elisa
巴斯德酵母 2,6-二溴苯血紅蛋白EElisa
彎曲高溫單孢 3,4,6-三噠Ⅰ型血小板反應蛋白7A域Elisa
桑莖點霉 N-Cbz-D-絲百白破抗體Elisa
南方異擔子 3-溴-2,4,6-三磺基轉移Elisa
煙曲霉 4-溴--氟苯Preptin蛋白Elisa
灰平鏈霉 檸檬酸鋰肉堿脂酰轉移1Elisa
枯斑擬盤多毛孢 2,4-二喹唑啉Ⅶ抗體Elisa
食氮嗜異生質 3-乙氧基-4-甲氧基苯甲核仁蛋白14Elisa
漢遜德巴酵母 3-溴-4-Ki-67蛋白Elisa
阪崎腸桿 芐氧基乙Ⅲ型膠原α1Elisa