詳細介紹
商品介紹:
商品介紹 測定意義: LDH(EC 1.1.1.27)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,是糖酵解途徑的末端酶,催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應,伴隨著NAD+/NADH之間互變。 測定原理: LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸進一步與2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在堿性溶液中顯棕紅色,顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
微量法 | 100管/48樣 | AS63213 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細菌、細胞或組織樣品的制備: 細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
產(chǎn)品優(yōu)點如下:
1、快速簡便:雙試劑,直接操作,快速、簡便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗: X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。且特異性強,不受類SOD物質的干擾8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
誘導型一氧化氮合成(iNOS)英文名:iNOS ELISA Kit磷化毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗體包裝25g
游離脂肪(FFA)英文名:FFA ELISA Kit?;摎溟L鏈抗體包裝5g
游離三碘狀腺原(Free-T3)英文名:Free-T3 ELISA Kit分裂周期蛋白5抗體包裝1g
游離狀腺(FT4)英文名:FT4 ELISA Kitβ淀粉樣肽/Aβ42抗體包裝5g
游離睪(F-TESTO)英文名:F-TESTO ELISA KitADCK4蛋白抗體包裝5g
幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)英文名:Hp-IgG ELISA Kit抑癌蛋白AIMP3抗體包裝100mg
印度刺猬因子(IHH)英文名:IHH ELISA Kit相關蛋白AKAP抗體包裝1g
胺2,3-雙加氧1(IDO1)英文名:IDO1 ELISA Kit蛋白激A錨定蛋白6抗體包裝250mg
音猬因子N端(Shh-N)英文名:Shh-N ELISA Kit肺α/β解蛋白1抗體包裝5g
抑制B(INH-B)英文名:INH-B ELISA Kit解結構域蛋白13抗體包裝25g
抑制A(INH-A)英文名:INH-A ELISA Kit解結構域蛋白14B抗體包裝5g
抑瘤M(OSM)英文名:OSM ELISA Kit解結構域蛋白15抗體包裝1g
乙型肝炎核心抗體(HBcAb)英文名:HBcAb ELISA Kit肺α/β解蛋白3抗體包裝250mg
乙型肝炎表面抗原(HBsAg)英文名:HBsAg ELISA Kit三磷腺苷結合盒轉運蛋白F亞基3抗體包裝5g
乙型肝炎表面抗體(HBsAb)英文名:HBsAb ELISA Kit三磷腺苷結合盒轉運蛋白A亞基5抗體包裝100g
激活受體1A抗體層粘連蛋白(LN)Allitinib tosylate (AST-1306 TsOH) 是不可逆的EGFR和ErbB2抑制劑,IC50分別為0.5 nM和3 nM,對突變型EGF
乳酸脫氫酶(LDH)測試盒100管/48樣*百脈根根瘤 N,N'-二羥甲基脲apelin 13Elisa
黃微綠鏈霉 甲磺酸甲酯apelin 36Elisa
變幻青霉 七葉皂苷Argonaut-2蛋白Elisa
大豆慢生根瘤 千金藤ATPElisa
尖鐮孢 七葉皂苷鈉ATP依賴的RNA解旋AElisa
登木植物放線孢 米力農(nóng)B7-1Elisa
釀酒酵母 沒食子酸辛酯B7同系物6Elisa
產(chǎn)黃青霉 甲基丁香B7同源體1Elisa
巨獸芽孢桿 桔皮B7同源體2Elisa
pETPT7 黃楊堿B7同源體3Elisa
芽孢桿屬 雙氫青蒿Bcl-2相關X蛋白Elisa
糞腸球 BH3結構域凋亡誘導蛋白Elisa
檸檬黃色農(nóng)球 秦皮乙Bmi-1基因Elisa
赤曲霉 芹菜BPDE-DNA加合物Elisa
灰平鏈霉 漆黃BrevicanElisa