詳細介紹
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 100管/96樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS632152 |
商品介紹:
測定意義: 脂質過氧化是動植物體內(nèi)活性氧(ROS)氧化生物膜的過程,脂質過氧化物(LPO)是脂質過氧化過程的產(chǎn)物,即ROS與生物膜的磷脂、酶和膜受體相關的多不飽和脂肪酸的側鏈及核酸等大分子物質起脂質過氧化反應形成LPO,使細胞膜的流動性和通透性發(fā)生改變,最終導致細胞結構和功能的改變。因此,LPO常被作為機體氧化應激的一種指標,與某些疾病的病理過程,如腫瘤、化學中毒、感染、炎 癥、自身免疫疾病、動脈粥樣硬化(AS)及心腦血管疾病,以及衰老等生理過程密切相關。 測定原理: LPO在酸性條件下加熱,產(chǎn)生小分子終產(chǎn)物MDA,MDA與硫代巴bi妥酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,在535nm有最大吸收峰。 需自備的儀器和用品: 酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。喊凑战M織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
上皮中性粒細胞激活肽78(ENA78)英文名:ENA78 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白25抗體包裝500mg
上皮性鈣黏附蛋白(CDHE)英文名:CDHE ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白28A抗體包裝1g
上皮型脂肪結合蛋白(FABP5)英文名:FABP5 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白28B抗體包裝5g
殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)英文名:BPI ELISA Kit腫瘤/抗原74抗體包裝1g
色胺羥化2(TPH2)英文名:TPH2 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白38抗體包裝25g
色胺羥化1(TPH1)英文名:TPH1 ELISA Kit7號染色體開放閱讀框72抗體包裝5g
三葉因子3(TFF3)英文名:TFF3 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白42抗體包裝100g
三葉因子2(TFF2)英文名:TFF2 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白47抗體包裝25g
三肽基肽Ⅰ(TPP1)英文名:TPP1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白43抗體包裝5g
三磷腺苷(ATP)英文名:ATP ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白46抗體包裝1g
三磷肌(IP3)英文名:IP3 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白63抗體包裝1g
朊病毒蛋白(PRNP)英文名:PRNP ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白54抗體包裝5g
軟骨關聯(lián)蛋白(CRTAP)英文名:CRTAP ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白61抗體包裝100ml
軟骨寡聚基質蛋白(COMP)英文名:COMP ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白8抗體包裝25ml
乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)英文名:MFGE8 ELISA Kit神經(jīng)酰激CERK抗體包裝100g
: AS3.2783資源名稱: 泡盛曲霉 質量規(guī)格:純度> 98%,BR,可用于培養(yǎng)轉化生長因子β激蛋白22試劑盒紫檀芪;Pterostilbene
平滑假絲酵母Candida│parapsilosis 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品轉化生長因子β3試劑盒竹節(jié)參皂苷IVa;Chikusetsu
普通變形桿菌Proteus│vulgaris 質量規(guī)格:純度>98%,BR,可用于培養(yǎng)轉化生長因子β2試劑盒梓;Catalponol
脂質過氧化物(LPO)測試盒100管/96樣枯草芽孢桿 2,3-二羥基萘-6-磺酸鈉血管內(nèi)皮生長因子受體1Elisa
釀酒酵母 雙芬酸血管內(nèi)皮生長因子受體2Elisa
枯草芽孢桿 2-氨基-4-溴甲酯血管內(nèi)皮粘附分子1Elisa
熱帶假絲酵母 一頻哪酮血管內(nèi)皮抑Elisa
溜曲霉 2-氨基-3-溴吡啶血管黏附蛋白Elisa
棲藻海桿狀 3-基甲酯血管生成1Elisa
西蕃蓮莖基腐病 (S)-(-)-Alpha-氨基-Gamma-丁內(nèi)酯鹽血管生成2Elisa
芽孢桿 高酸鎳(II)六水合物, Reagent Grade血管生成受體酪激2Elisa
山柑芽孢桿 Fmoc-L-正纈血管生成樣蛋白2Elisa
假單胞屬 2-甲基-4-硝基吡啶血管生成樣蛋白3Elisa
繩狀籃狀 2-苯甲酰噻吩血管生長Elisa
Bacillus (4-)苯血管性血友病因子Elisa
金針菇—HP3 六水合磷酸鎂血紅蛋白Elisa
黑孢霉 酸鎳六水合物血紅蛋白CElisa
大腸埃希 化釹六水合物血紅蛋白FElisa