磷酸酶抑制劑

磷酸酶抑制劑公司正在銷售的產(chǎn)品：Anti-ZNF785 Antibody人1,25二羥基
Anti-ZP4 Antibody人組蛋白H2b
Anti-ZRANB2 Antibody人骨保護(hù)素
Anti-ZNHIT1 Antibody人骨成型蛋白受體Ⅱ
Anti-ZNRF2 Antibody人骨成型蛋白受體1A
Anti-ZRANB2 Antibody人骨成型蛋白4
Anti-ZSCAN2

產(chǎn)品分類：酶抑制劑

儲存條件：—20℃,12個月

用途：用于動物細(xì)胞或組織蛋白的提取,能zui大程度地保持蛋白質(zhì)磷酸化,常用于動物細(xì)胞或組織中蛋白激酶活性和信號傳導(dǎo)的研究。

注意事項：為多種磷酸酶抑制劑混合液,可有效抑制酪氨酸磷酸酶、絲氨酸磷酸酶、蘇氨酸磷酸酶、酸性和堿性磷酸酶等各種磷酸酶。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

 

配制與標(biāo)定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

林生蠟?zāi)⒘谆?/span>Rad51抗體Anti-EDA Antibody2(PRM2)

具核梭桿菌聚核亞種磷化成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體Anti-EDA Antibody釉原蛋白Y-連鎖(AMELY)

毛木耳（臺耳）磷化G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體Anti-EDNRB Antibody釉原蛋白X-連鎖(AMELX)

藤倉鐮孢G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體Anti-EDNRB Antibody(PB0585)釉成熟蛋白(AMTN)

枯草芽孢桿菌環(huán)指蛋白1抗體Anti-EED Antibody誘導(dǎo)型一氧化氮合(NOS2)

糞腸球菌原癌基因c-Met相關(guān)酪激抗體Anti-EEA1 Antibody有機(jī)溶質(zhì)載體伴侶1(OSCP1)

尿八疊球菌磷化原癌基因c-Met相關(guān)酪激抗體Anti-EGF Antibody游離脂肪受體1(FFAR1)

類諾氏菌屬腫瘤血管內(nèi)皮調(diào)節(jié)蛋白Robo4抗體Anti-EGF Antibody硬脂酰去飽和(SCD)

馬里斯棒狀桿菌軸突導(dǎo)向受體抗體Anti-EGF Antibody硬纖毛蛋白(STRC)

馬賽菌絡(luò)絲蛋白抗體Anti-EGF Antibody應(yīng)激誘導(dǎo)磷蛋白1(STIP1)

頭花革菌RUSC1抗體Anti-EGFR Antibody營養(yǎng)蛋白(TRO)

枯草芽胞桿菌RUSC2抗體Anti-EGFL6 Antibody隱花色2(CRY2)

釀酒酵母RAGEF2蛋白抗體Anti-EGFR Antibody隱花色1(CRY1)

釀酒酵母G蛋白偶聯(lián)受體RAB23抗體Anti-EGFR Antibody乙-N-甲基轉(zhuǎn)移(INMT)

山茶G蛋白信號調(diào)節(jié)因子14抗體Anti-EGFR Antibody陰離子/糖轉(zhuǎn)運蛋白(AST)

油菜假單胞菌核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB受體/核因子kB受體活化因子抗體Anti-EGFR Antibody易位關(guān)聯(lián)膜蛋白1(TRAM1)

致病性大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

擬內(nèi)孢霉Endomycopsis│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,可用于培養(yǎng)

莖點霉Phoma│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
磷酸酶抑制劑ATRN/FITC  熒光su標(biāo)記吸引suIgG規(guī)格： 0.2ml

ATX/Autotaxin/E-NPP2/FITC  熒光su標(biāo)記自分泌運動因子IgG規(guī)格： 0.2ml

ATXN1/Ataxin 1/FITC  熒光su標(biāo)記兔抗人、大、小鼠失調(diào)癥蛋白1IgG規(guī)格： 0.2ml

Ataxin-1(phospho Ser776)/FITC  熒光su標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷suan化失調(diào)癥蛋白1IgG規(guī)格： 0.2ml

AU5 tag/FITC  熒光su標(biāo)記AU5 tag標(biāo)簽IgG規(guī)格： 0.2ml