商品屬性:
商品介紹:
測定意義 硝態(tài)氮是植物最主要的氮源。植物體內(nèi)硝態(tài)氮含量反映了土壤中硝態(tài)氮的供應(yīng)情況,可作為土壤氮肥的指標(biāo)。測定植物體內(nèi)的硝態(tài)氮含量,不僅能夠反映出植物的氮素營養(yǎng)情況,而且對鑒定蔬菜和以植物為原料的加工制品的品質(zhì)也有重要的意義。 測定原理 在濃酸條件下,NO3-與水楊酸反應(yīng),生成硝基水楊酸,硝基水楊酸在堿性條件下(PH>12)呈黃色,在一定范圍內(nèi),其顏色深淺與含量成正比,可比色測定計(jì)算得硝態(tài)氮含量。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 蒸餾水、天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
阿扎那韋(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Moxifloxacin Hydrochloride7號染色體開放閱讀框25抗體包裝1g
阿扎那韋硫鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Moxifloxacin HydrochlorideCOG1蛋白抗體包裝25g
艾地醌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Salmeterol xinafoate過敏C3受體/補(bǔ)體C3受體抗體包裝5g
愛普列特(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: NaproxenCD3抗體包裝1g
安倍生坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: NaproxenCP2相關(guān)轉(zhuǎn)錄抑制因子1抗體包裝5g
安乃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Prednisone電壓依賴型N型鈣通道α1B抗體包裝1g
安替比林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Prednisone煙堿型乙酰受體A2(神經(jīng)型)抗體包裝5g
蝶啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Doxycycline monohydrate/Doxycycline baseC型凝集結(jié)構(gòu)域家族1成員A抗體包裝25g
砜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Zoledronic acid hydrateγ干擾誘導(dǎo)單核因子抗體包裝5g
芐西林/芐青霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Zoledronic acid hydrate血小板因子4抗體包裝1g
芐西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Pamidronate Disodium血小板趨化因子7蛋白抗體包裝250mg
丁三(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Pamidronate Disodium干擾誘導(dǎo)T趨化因子抗體包裝5g
芬鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Gentamicin sulfate B-淋巴趨化因子抗體包裝100g
基比林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Gentamicin sulfate 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體包裝25g
基己(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Cefuroxime Sodium 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白14抗體包裝5g
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%,BR血管生長試劑盒α-香附;α-Cyperone
ATCC15173=CCUG407=CIP7715=DSM30026=ICPB4221=IFO15125=JCM5490=LMG1231=NCTC8582=AS1.1800資源名稱: 木糖氧化產(chǎn)堿菌反硝化亞種 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品血管內(nèi)皮抑抗體試劑盒異內(nèi)酯;linderalactone
南方鹽單胞菌Halomonas│meridiana 質(zhì)量規(guī)格:含量>99.0%血管內(nèi)皮粘附分子1試劑盒新藤黃;neogambogic aci
植物硝態(tài)氮測試盒50管/48樣霍氏腸桿 L-天冬-4-芐酯糖脂抗體Elisa
尖孢鐮刀 五吡啶胞裂蛋白9Elisa
釀酒酵母 5-溴-2-牛痘病IgMElisa
哈茨木霉 衣康酸酐唾液睪酮Elisa
綠色木霉 4-甲氧基-2-氧代-1,2-二氫-3-基吡啶D-絲Elisa
球孢白僵 1,10-二癸烷趨化因子20Elisa
金灰青霉 2--5-羥趨化因子28Elisa
毛木耳 2,3,4-三羥基苯甲空泡相關(guān)蛋白A抗體Elisa
金龜子綠僵 5--2-羥基-3-硝基吡啶腦膜炎奈瑟氏Elisa
死亡谷芽孢桿 2',3'-O-異叉髓過氧化物Elisa
傳染性法氏囊病病 鄰三甲苯介苗抗體Elisa
慢生根瘤 草酸鈮(V)酪Elisa
堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿 2-乙氧基苯酸過氧化氫Elisa
雞傷寒沙門氏 3--2-氟苯β氨基己糖苷AElisa
嗜果刀孢 4-溴-2-氟類缺陷病Elisa