SM緩沖液

SM緩沖液公司正在銷售的產(chǎn)品：兔基質(zhì)金屬蛋白酶17(MMP-17)試劑盒Anti-CDK4 Antibody(0563)蛋白質(zhì)磷酸酶2調(diào)節(jié)亞基1B抗體
兔異常凝血酶原(APT)試劑盒 Anti-CDK5 Antibody蛋白質(zhì)磷酸酶2調(diào)節(jié)亞基3A抗體
兔生長分化因子2(GDF2)試劑盒Anti-CDK5R1 Antibody蛋白質(zhì)磷酸酶1B抗體（PP2Cβ）
兔III型前膠原氨基端原肽(PIII

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

產(chǎn)品分類：培養(yǎng)基

儲存條件  4℃,12個月

用途  λ噬菌體原種的保存和稀釋，又稱SM液

注意事項  無菌溶液。也稱為Tris-SM緩沖液,主要由氯化鈉、TRIS、硫酸鎂、明膠等組成。經(jīng)高壓滅菌處理。

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

乳腺癌易感蛋白2(BRCA2)BRCA2 ELISA Kit分裂周期樣激2抗體包裝25g

乳鐵傳遞蛋白(LTF)LTF ELISA Kit分裂周期樣激3抗體包裝5g

乳脫氫B(LDHB)LDHB ELISA Kit17號染色體開放閱讀框49抗體包裝1g

乳過氧化物(LPO)LPO ELISA Kit17號染色體開放閱讀框53抗體包裝25g

肉毒堿棕櫚?；D(zhuǎn)移1A(CPT1A)CPT1A ELISA Kit17號染色體開放閱讀框57抗體包裝5g

肉毒堿乙酰轉(zhuǎn)移(CRAT)CRAT ELISA Kit17號染色體開放閱讀框64抗體包裝1g

融合蛋白(FUS)FUS ELISA Kit17號染色體開放閱讀框66抗體包裝250mg

溶質(zhì)載體家族30成員7(SLC30A7)SLC30A7 ELISA Kit17號染色體開放閱讀框74抗體包裝1g

溶質(zhì)載體家族30成員6(SLC30A6)SLC30A6 ELISA Kit17號染色體開放閱讀框75抗體包裝250mg

溶質(zhì)載體家族30成員5(SLC30A5)SLC30A5 ELISA Kit17號染色體開放閱讀框77抗體包裝5g

溶質(zhì)載體家族30成員4(SLC30A4)SLC30A4 ELISA Kit17號染色體開放閱讀框78抗體包裝1g

溶質(zhì)載體家族30成員3(SLC30A3)SLC30A3 ELISA Kit維調(diào)節(jié)核基質(zhì)相關(guān)蛋白抗體包裝5g

溶質(zhì)載體家族30成員10(SLC30A10)SLC30A10 ELISA Kit17號染色體開放閱讀框42抗體包裝1g

溶質(zhì)載體家族30成員1(SLC30A1)SLC30A1 ELISA Kit17號染色體開放閱讀框97抗體包裝250mg

溶血酰基轉(zhuǎn)移4(LPCAT4)LPCAT4 ELISA Kit貓眼綜合征染色體候選基因1抗體包裝100g

猴頭菌Hericium│erinaceus (Bull.) Pers. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒蔗糖;Sucrose

芽胞桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：945-1030 ug /mg,二物轉(zhuǎn)化生長因子α試劑盒正丁基酞;3-n-Butylphath

結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格：效價測定轉(zhuǎn)谷酰2C多肽試劑盒知母皂苷B;Anemarsaponin
SM緩沖液GRM2/FITC  熒光標記代謝型谷氨受體2IgG鄰菲羅啉鹽鹽 AR，97.0 %

CD11a/FITC  熒光標記整合-αMIgG鄰菲羅啉鹽鹽 98%

Phospho-GRM2/GLUR2 (Tyr869/873/876) /FITC  熒光標記兔抗人、大、小鼠化GRM2蛋白IgG卟啉類顯色劑 顯色劑

Phospho-GRM2/GLUR2 (Tyr876) /FITC  熒光標記兔抗人、大、小鼠化GRM2蛋白IgG孟加拉玫瑰紅 BR

GRM2+GRM4/FITC  熒光標記促代謝型谷氨受體2+4IgGⅢ CP

Integrin Alpha X/CD11c/FITC  熒光標記整合αXIgG磺S 顯色劑，96.0%

GRM3/FITC  熒光標記代謝型谷氨受體M3IgG蘇丹I  Dye content 98%

IL6R Alpha /FITC  熒光標記白介6受體αIgG三溴偶氮胂 顯色劑

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。