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Tris-Maleate緩沖液

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更新時(shí)間:2022-07-28 14:46:38瀏覽次數(shù):344

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500ml
貨號(hào) FS-R7200 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 貨號(hào) FS-R7200
Tris-Maleate緩沖液公司正在銷售的產(chǎn)品:人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因α(GROα/CXCL1)試劑盒 Anti-LDB2 Antibody人膜粘連蛋白 Ⅱ ELISA 試劑盒
人粒趨化蛋白2(GCP-2)試劑盒Anti-LDB1 Antibody小鼠膽堿磷酸甘油酯
人白介素8(IL-8)試劑盒Anti-LDLRAD2 Antibody大鼠膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶
人10kDa干擾素γ誘導(dǎo)蛋白(IP-10/

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品分類:免疫組化

儲(chǔ)存條件:室溫,12個(gè)月

用途:免疫組化和染色中的常規(guī)緩沖液

注意事項(xiàng):主要由馬來(lái)酸/順丁烯二酸溶液、TRIS水溶液、氫氧化鈉溶液按不同比例混合而成,獲得相應(yīng)PH值。pH值可選5.08,5.3,5.52,5.7,5.88,6.05,6.27,6.5,6.86,7.2,7.5,7.75,7.97,8.15,8.3,8.45。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購(gòu)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

Tris-Maleate緩沖液

500ml

FS-R7200

 

63.jpg 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來(lái)水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。

13.jpg 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定:

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái),保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來(lái)實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過(guò)夜;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4)  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

鏈格孢菌叉頭蛋白O3A抗體Human AGPS (Alkyldihydroxyacetonephosphate synthase, peroxisomal) ELISA KIT綿羊白蛋白(Albumin)免疫試劑盒

尖鱗黃傘卵泡相關(guān)蛋白1Human AIF1L (Allograft inflammatory factor 1-like) ELISA KIT綿羊γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒

(疣孢漆斑菌)成纖維生長(zhǎng)因子受體5抗體Human AMER1 (APC membrane recruitment protein 1) ELISA KIT綿羊C反應(yīng)蛋白(CRP)免疫試劑盒

硬結(jié)桿菌磷化粘著斑激抗體Human ADSSL1 (Adenylosuccinate synthetase isozyme 1) ELISA KIT綿羊5羥色/血清/血清(5HT/ST)免疫試劑盒

擬盤多毛孢屬磷化粘著斑激抗體Human AMBN (Ameloblastin) ELISA KIT綿羊5羥二十碳四烯(5-HETE)免疫試劑盒

干草鞘單胞菌口蹄疫病A型抗體Human ADRB2 (Beta-2 adrenergic receptor) ELISA KIT綿羊3-硝基酪(3-NT)免疫試劑盒

植物乳桿菌FBXO28蛋白抗體Human AAGAB (Alpha- and gamma-adaptin-binding protein p34) ELISA KIT綿羊Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)免疫試劑盒

釀酒酵母FBXW5蛋白抗體Human ALMS1 (Alstrom syndrome protein 1) ELISA KIT綿羊17羥孕(17-OHP)免疫試劑盒

土地芽孢桿菌FBXW12蛋白抗體Human ADRA1D (Alpha-1D adrenergic receptor) ELISA KIT貓

根瘤菌FBXO42蛋白抗體Human AMDHD1 (Probable imidazolonepropionase) ELISA KIT貓腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒

貝酵母FasL抗體Human ADIG (Adipogenin) ELISA KIT貓?jiān)屑?孕(PROG)免疫試劑盒

肇慶曲霉原纖維蛋白1抗體Human ARFGEF1 (Brefeldin A-inhibited guanine nucleotide-exchange protein 1) ELISA KIT貓游離狀腺原(Free-T3)免疫試劑盒

秦氏蜜環(huán)菌胰腺衍生因子抗體Human FDX1L (Adrenodoxin-like protein, mitochondrial) ELISA KIT貓游離甲狀腺(FT4)免疫試劑盒

煙曲霉性成纖維生長(zhǎng)因子抗體Human ADPRH ([Protein ADP-ribosylarginine] hydrolase) ELISA KIT貓血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)免疫試劑盒

硬結(jié)節(jié)桿菌8/第八/第八因子相關(guān)抗原抗體Human RRM2(Ribonucleoside-diphosphate reductase subunit M2) ELISA Kit貓?zhí)剪?(CA9)免疫試劑盒

假結(jié)合棒桿菌8/第八/第八因子相關(guān)抗原抗體Human ABR (Active breakpoint cluster region-related protein) ELISA KIT貓嗜粒趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)免疫試劑盒

青銅小單孢菌Micromonospora│chalcea 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.0%(GC)補(bǔ)骨脂二氫黃

泡波曲霉屬Emericella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC)補(bǔ)骨脂定

小菌核菌Sclerotium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品表兒茶
Tris-Maleate緩沖液Human macrophage stimulating protein,MSP ELISA Kit  人巨噬細(xì)胞刺激蛋白規(guī)格: 48T

Human mammalian target of rapamyein,mTOR ELISA Kit  人雷帕霉su靶蛋白規(guī)格: 48T

Human Nuclear matrix protein 22,NMP-22 ELISA Kit  人核基質(zhì)蛋白22規(guī)格: 48T

Human cartilage oligomeric protein,COMP ELISA Kit  人軟骨寡聚蛋白規(guī)格: 48T

Human multidrug resistance-associated protein,MRP ELISA Kit   人多藥耐藥相關(guān)蛋白規(guī)格: 48T


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