公司產(chǎn)品僅供科研使用:
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義: 蔗糖轉(zhuǎn)化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。根據(jù)最適 pH,將高等植物Ivr分為酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(NI)兩種類型。 NI主要存在于細(xì)胞質(zhì)中,負(fù)責(zé)分解細(xì)胞質(zhì)中蔗糖為果糖和葡萄糖。 測(cè)定原理: NI催化蔗糖分解產(chǎn)生還原糖,進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸反應(yīng),生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內(nèi)510nm光吸收值與還原糖生成量成正比。通過光吸收增加速率來計(jì)算NI活性 自備用品: 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
玳瑁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Ketanserin胰島抗原12/核轉(zhuǎn)錄因子SOX13抗體包裝1g
丹參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: DL-Octopamine HCl有絲分裂相關(guān)蛋白INSC抗體包裝5g
丹參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Sulindac磷化核因子NFκB抑制蛋白激i抗體包裝5g
丹參鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: SulindacRAN結(jié)合蛋白7抗體包裝25g
丹參IIA(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Tropic acid兔抗人γ-鏈包裝5g
丹參IIA-磺鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 2-Ketoglutaric acid免疫球蛋白超家族成員B抗體包裝1g
丹參I(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 2-Ketoglutaric acid六磷肌激3抗體包裝25g
丹A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Cabozantinib(BMS907351)干擾kappa蛋白抗體包裝5g
丹B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: H-D-SER-OET HCL白介1α/IL-1α抗體包裝1g
丹B二酯英文名: Asenapine Maleate白介1α/IL-1α抗體包裝5g
丹C(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Trityl candesartan cilexetil磷化白介2受體β鏈抗體包裝100g
丹D(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Tamoxifen胰島樣蛋白3抗體包裝25g
丹F英文名: Cefotiam hydrochloride內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白a1抗體包裝5g
丹皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Cefotiam hydrochloride重組人白介18抗體包裝25g
丹皮新苷英文名: (2E,4S)-4-Hydroxy-3,7-dimethyl-2,6-octadien-1-yl beta-D-glucopyranosideα重鏈H4抗體包裝5g
副結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│paratuberculosis 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定可溶性CD163分子試劑盒黃柏堿;Phellodendrine
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR可溶性CD146分子試劑盒哈巴苷;harpagide
死亡谷芽孢桿菌Bacillus│vallismortis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品可溶性CD100試劑盒哈巴俄苷;Harpagoside
中性轉(zhuǎn)化酶(NI)測(cè)試盒100管/48樣pHY300PLK 2-(5-溴吡啶-2-基)2-甲基羧酸酯Elisa
Enterobacter cowanii 4-溴-2,5-二氟乙酰酯Elisa
大豆慢生根瘤 環(huán)己烷酸頻那酯神經(jīng)酰合Elisa
釀酒酵母 3,5-二氟-4-甲?;交崆拾奔lisa
白蘑 3-[[5-甲基-2-(1-甲基乙基)環(huán)己基]氧]-1,2-β-羥基丁酸Elisa
大腸埃希 2-異氧基-5-溴吡啶幾丁質(zhì)8受體激Elisa
缺陷短波單胞 7-氨基-4-羥基-2-萘磺酸麥豆球蛋白Elisa
沙雷氏 2-苯酸頻那酯高分子量清蛋白Elisa
銀耳、白木耳(可訂購) 4-(芐氧基)苯-1-磺酰麥溶蛋白Elisa
產(chǎn)氣腸桿 4,7-二喹啉羥基自由基Elisa
小串鏈霉 6--5-硝基喹啉檸檬酸Elisa
破傷風(fēng)試驗(yàn) 2-溴-5-三氟甲基芐鎂原卟啉ⅨElisa
釀酒酵母 (S)-N-芐氧羰基-3-氨基-3-苯基-1-5-氨基乙酰酸Elisa
印度農(nóng)霉 5-疏基-1-苯基-四氮唑唾液酸Elisa
塔賓曲霉 TFA-aa-U醌氧化還原4Elisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。