詳細(xì)介紹
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
紫外分光光度法 | 50管/24樣 | AS6321183 |
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義:LOX廣泛存在于動(dòng)植物組織中,催化不飽和脂肪酸氧化反應(yīng),導(dǎo)致膜脂過(guò)氧化。在生物體的生長(zhǎng)發(fā)育、成熟衰老及逆境脅迫過(guò)程中具有重要作用。測(cè)定原理:LOX催化亞油酸氧化,氧化產(chǎn)物在280nm處有特征吸收峰;測(cè)定280nm吸光度增加速率,來(lái)計(jì)算LOX活性。自備儀器和用品:研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1mL石英比色皿、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。 |
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類(lèi)SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
肉蓯蓉苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 4'-Hydroxyazobenzene-4-carboxylic Acid HydrateS轉(zhuǎn)移κ抗體包裝50g
肉豆蔻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Carboxymethoxylamine Hemihydrochloride半乳糖激1抗體包裝1g
肉豆蔻木脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Girard's Reagent P糖原蛋白2抗體包裝5g
肉豆蔻,十四烷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 4-Phenyl-1,2,4-triazoline-3,5-dione磷半乳糖尿苷轉(zhuǎn)移1抗體包裝1ml
肉桂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: N-tert-Butyl-α-phenylnitrone糖原蛋白1抗體包裝5g
肉桂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 16-DOXYL-stearic Acid Free Radical葡萄糖合成2抗體包裝250mg
肉桂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: CLA谷草轉(zhuǎn)2抗體包裝10g
肉桂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: MCLA葡萄糖-6磷脫氫抗體包裝250g
肉桂葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: FCLA Free Acid葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5抗體包裝50g
乳香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Red-CLA葡萄糖合成1抗體包裝1g
瑞香/祖師麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: IsoluminolG蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體包裝250mg
塞骨(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Bis[3,4,6-trichloro-2-(pentyloxycarbonyl)phenyl] Oxalate甘油激3抗體包裝25g
噻二(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Disodium 8-Amino-1,3,6-naphthalene 3sulfonate Hydrate高爾基體磷蛋白3樣蛋白抗體包裝1g
噻二苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Coumarin 102磷化谷受體1抗體包裝5g
賽門(mén)苷I(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Coumarin 314G蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝1g
葡萄穗霉Stachybotrys│chartarum 質(zhì)量規(guī)格:>98%尿苷二磷葡萄糖轉(zhuǎn)移1試劑盒蘿卜硫苷;Glucoraphanin
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>98%鳥(niǎo)苷結(jié)合蛋白4試劑盒藜蘆基;3,4-Dimethoxybe
肺炎克雷伯氏菌Klebsiella│pneumoniae 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定鳥(niǎo)苷交換因子試劑盒藜蘆;Veratraldehyde
脂氧合酶 (LOX)測(cè)試盒50管/24樣黑曲霉 檸檬酸鋰 四水合物磷酸化外紡錘體樣蛋白1Elisa
香菇 2,5-二氟-4-羥基苯甲鳥(niǎo)苷酸交換因子Elisa
明尼蘇達(dá)被毛孢 6-羧基四甲基羅丹明 for fluorescence,能受體P2Y11Elisa
武夷小單孢 1-Boc-3-基血管緊張Ⅰ受體抗體Elisa
北京芽孢桿 1-BOC--4-甲酰載脂蛋白L2Elisa
米曲霉 6--2--3-酸蛋白酪磷酸OElisa
類(lèi)諾氏 3-溴-2-羧酸乙酯核糖核蛋白BElisa
蠅鵝膏 基乙鳥(niǎo)苷酸Elisa
泡囊短波單胞 3-(N-Boc-氨基)氮雜丁烷類(lèi)泛蛋白Elisa
大腸埃希氏 D-二異酯磷酸化酮酸脫氫Elisa
Pseudarthrobacter 2-丁氧基苯酸前膠原賴(lài)-1,2-酮戊二酸-5-雙加氧1Elisa
弗雷德里克斯堡假單胞 2-乙基乙血小板糖蛋白VElisa
大腸桿 5-戊血小板衍化生長(zhǎng)因子DDElisa
康氏木霉 Fmoc-L-精激活受體樣激1Elisa
蒼白鹽八疊球 6-煙酰四旋蛋白2Elisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。