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公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
Sorensen磷酸緩沖液 | 500ml | FS-R7198 |
產品分類:免疫組化
儲存條件:4℃,12個月
用途:組織化學常用緩沖液
注意事項:主要由磷酸二氫鹽(鈉/鉀)和磷酸氫二鹽(鈉/鉀)溶液組成,按不同比例混合后獲得對用PH值。pH值可選5.3,5.6,5.91,6.24,6.47,6.64,6.81,6.98,7.17,7.73,8.04。
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。
腐皮鐮孢菌二單加氧5抗體Human AMHR2 (Anti-Muellerian hormone type-2 receptor) ELISA KIT綿羊甲狀腺(T4)免疫試劑盒
球孢白僵菌磷化脆性X綜合征相關蛋白AFF1抗體Human EHMT2 (Histone-lysine N-methyltransferase EHMT2) ELISA KIT綿羊基質金屬蛋白9/明膠B(MMP9/Gelatinase B)免疫試劑盒
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糞產堿桿菌甲精結合蛋白3抗體Human ADORA1(Adenosine receptor A1) ELISA Kit綿羊基質金屬蛋白1(MMP1)免疫試劑盒
MarisediminicolaⅢ型纖維連接蛋白域蛋白3A抗體Human AMMECR1L (AMMECR1-like protein) ELISA KIT綿羊饑餓激(GHRL)免疫試劑盒
毛栓孔菌Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白4抗體Human AEN (Apoptosis-enhancing nuclease) ELISA KIT綿羊黃體生成(LH)免疫試劑盒
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北里胞菌葉鹽多谷合成抗體Human AATK (Serine/threonine-protein kinase LMTK1) ELISA KIT綿羊環(huán)磷鳥苷(cGMP)免疫試劑盒
Arenibacter certesii 胚胎干相關蛋白FOPNL抗體Human Appbp2(Amyloid protein-binding protein 2) ELISA Kit綿羊花生四烯(AA)免疫試劑盒
魯能鎖擲孢酵母磷化癌基因FOS蛋白B抗體Human ANAPC2 (Anaphase-promoting complex subunit 2) ELISA KIT綿羊骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)免疫試劑盒
弗氏檸檬桿菌叉頭蛋白D2抗體Human ANK1(Ankyrin-1) ELISA Kit綿羊睪(T)免疫試劑盒
卷枝毛霉叉頭蛋白E3抗體Human ANLN (Actin-binding protein anillin) ELISA KIT綿羊甘油-3-磷脫氫(GAPDH)免疫試劑盒
運動節(jié)桿菌叉頭蛋白F2抗體Human ANKFY1 (Rabankyrin-5) ELISA KIT綿羊肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)免疫試劑盒
根瘤菌叉頭蛋白H1抗體Human Appbp2(Amyloid protein-binding protein 2) ELISA Kit綿羊肺表面活性物質相關蛋白B(SP-B)免疫試劑盒
黃曲霉叉頭蛋白I1抗體Human ANAPC2 (Anaphase-promoting complex subunit 2) ELISA KIT綿羊酯化脂肪(NEFA)免疫試劑盒
紫云英根瘤菌磷化叉頭蛋白4抗體Human AIF1L (Allograft inflammatory factor 1-like) ELISA KIT綿羊二受體(ER-Alpha)免疫試劑盒
Staphylococcus│aureus 質量規(guī)格:standard for GC,>99.5%莰烯
: CBS158.86資源名稱: 釀酒酵母 質量規(guī)格:Standard for GC, ≥99.5% (GC)L-蛋(硫)
肉蘑(血紅鉚釘菇)Chroogomphus│rutilus (Schaeff.) O.K. Mill. 質量規(guī)格:Standard for GC,>99.7%(GC)DL-蛋(硫)
Sorensen磷酸緩沖液Human Acylation Stimulating Protein,ASP ELISA Kit 人?;碳さ鞍滓?guī)格: 48T
Human bactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPI ELISA Kit 人殺jun性/通透性增加蛋白規(guī)格: 48T
Human matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE ELISA Kit 人細胞外基質磷suan糖蛋白規(guī)格: 48T
Human replication protein A,RPA-70 ELISA Kit 人復制蛋白A規(guī)格: 48T
Human cartilage oligomeric matrix protein,COMP ELISA Kit 人軟骨寡聚基質蛋白規(guī)格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。