詳細(xì)介紹
產(chǎn)品分類(lèi):植物染色
儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月
用途:用于植物組織的染色。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),咨詢(xún)并訂購(gòu)!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
果膠染色液 | 4×50ml | FS-R7094 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來(lái)水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線(xiàn),搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái),保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線(xiàn),來(lái)確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線(xiàn)的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(劑量反應(yīng)曲線(xiàn))來(lái)實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過(guò)夜;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀(guān)察并評(píng)估細(xì)胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
沙漠畢赤酵母著絲粒蛋白I抗體Human KCNJ10(ATP-sensitive inward rectifier potassium channel 10) ELISA Kit人抗呼吸道合胞病抗體(RSV IgM)免疫試劑盒
黑曲霉著絲粒蛋白J抗體Human HSD17B10(3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase type-2) ELISA Kit人抗呼吸道合胞病(RSV)抗體免疫試劑盒
葡萄座腔菌著絲粒蛋白L抗體Human RAB10(Ras-related protein Rab-10) ELISA Kit人抗呼吸道合胞病(RSV)抗體(IgG)免疫試劑盒
芽孢桿菌屬著絲粒蛋白M抗體Human LILRB4(Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 4) ELISA Kit人抗紅抗體(RBC)免疫試劑盒
短芽孢桿菌著絲粒蛋白N抗體Human PPP1R14B(Protein phosphatase 1 regulatory subunit 14B) ELISA Kit人抗核周因子(APF)抗體免疫試劑盒
仙臺(tái)鏈霉菌著絲粒蛋白Q抗體Human LPPR4(Lipid phosphate phosphatase-related protein type 4) ELISA Kit人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)免疫試劑盒
阪崎克羅諾桿菌CENTB2蛋白抗體Human NBR1(Next to BRCA1 gene 1 protein) ELISA Kit人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)免疫試劑盒
類(lèi)干酪乳桿菌著絲粒蛋白Q抗體Human TTF2(Transcription termination factor 2) ELISA Kit人抗核糖核蛋白抗體(RNP-Ab)免疫試劑盒
新瀉基桿菌CENTA2蛋白抗體Human TCF7L2(Transcription factor 7-like 2) ELISA Kit人抗核仁抗體(ANA)免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌胞吞再循環(huán)相關(guān)銜接蛋白CENTB1抗體Human KCNJ10(ATP-sensitive inward rectifier potassium channel 10) ELISA Kit人抗核抗體(ANA)免疫試劑盒
NCI-H1563(人胚肺)磷化胞吞再循環(huán)相關(guān)銜接蛋白CENTB1抗體Human TBX21(T-box transcription factor TBX21) ELISA Kit人抗骨骼肌抗體(ASA)免疫試劑盒
公牛鏈霉菌CENTD1蛋白抗體Human DKKL1(Dickkopf-like protein 1) ELISA Kit人抗弓形體(tox)抗體(IgM)免疫試劑盒
釀酒酵母CENTG3蛋白抗體Human C1orf106(Uncharacterized protein C1orf106) ELISA Kit人抗弓形體(tox)抗體(IgG)免疫試劑盒
島生異擔(dān)子菌中心體蛋白3抗體Human TRIM22(E3 ubiquitin-protein ligase TRIM22) ELISA Kit人抗肝膜抗體(LMA)免疫試劑盒
抑制暗棕色桿菌中心體蛋白1+2抗體Human PRSS22(Brain-specific serine protease 4) ELISA Kit人抗肝胞質(zhì)1型抗體(LC1)免疫試劑盒
Sphingomonas中心體蛋白2抗體Human B7H6(B7 homolog 6) ELISA Kit人抗肝PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體-IgM(HIT)免疫試劑盒
: sh.15WeilIII-IV資源名稱(chēng): 福氏志賀氏菌 質(zhì)量規(guī)格:IND17羥皮質(zhì)類(lèi)固試劑盒8-姜烯
片球菌屬Pediococcus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:AR17-α-羥化試劑盒23-乙酰澤瀉C
柴油食烷菌Alcanivorax│dieselolei 質(zhì)量規(guī)格:AR16α羥基雌1試劑盒基麥冬高黃A
果膠染色液MMP-3(Human Matrix metalloproteinase 3) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白mei3規(guī)格: 48T
MMP-2/Gelatinase A(Human Matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白mei2/明膠meiA規(guī)格: 48T
MMP-13(Human Matrix metalloproteinase 13) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白mei13規(guī)格: 48T
MMP-(Human Matrix metalloproteinase ) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白mei規(guī)格: 48T
MMP-1(Human Matrix metalloproteinase 1) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白mei1規(guī)格: 48T