中性甲醛鈣固定液

中性甲醛鈣固定液公司正在銷售的產品：雞生長分化因子5(GDF5)試劑盒Anti-RTN3 AntibodyPE標記的羊抗牛IgG
雞垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體 (PACAPR)試劑盒Anti-RUNX1 Antibody(0170)PE標記的兔抗牛IgM
雞鳥苷酸交換因子(GEF)試劑盒 Anti-RUNX1T1 AntibodyAlexa Fluor 647標記的兔抗牛IgG
雞孕酮和adip

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

產品分類：固定液

儲存條件：室溫,12個月

用途：常規(guī)固定液，可用于脂肪組織的固定

注意事項：主要由甲醛、氯化鈣組成。

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。

黃芪（蒙古黃芪）（標準品） CUDC-101李斯特菌菌體蛋白抗體包裝500g

黃芪（膜莢黃芪）（標準品） Lomerizine hydrochlorideRho的鳥核苷交換因子12抗體包裝1g

黃芪苷(標準品) Resibufogenin白血病相關蛋白5抗體包裝25g

黃芪皂苷I(標準品) Taraxasterol富含亮重復蛋白62抗體包裝5g

黃芪皂苷II(標準品) TAK-875淋巴磷蛋白磷相關蛋白抗體包裝1g

黃芪皂苷III(標準品) Nitrendipine含亮神經膠質瘤失活蛋白4抗體包裝250mg

黃芪紫檀烷苷(標準品) Nitrendipine淋巴性白血病相關序列1抗體包裝1g

黃芪總黃 CinobufotalinL-瓜抗體包裝1g

黃芪總皂苷（標準品） Fenretinide(4-HPR)半胱蛋白抗體包裝1g

黃杞苷（標準品） 2-Aminopurine乳脫氫D抗體包裝5g

黃芩（標準品） ocinobufagin蛋白激LYK5抗體包裝250mg

(80%) Gamabufotalin促脂gamma抗體包裝5g

(95%) Bufotaline核纖層蛋白B受體抗體包裝25g

(標準品） Xanthurenic Acid長壽相關基因lASS1抗體包裝5g

黃芩 Sulbactam Acid長壽相關基因lASS6抗體包裝1g

枯草芽孢桿菌枯草亞種Bacillus│subtilis subsp. subtilis 質量規(guī)格：≥98.0%,標準品用于含量測定抗生長激試劑盒甘草;Glycyrrhizic aci

大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規(guī)格：870μg-1015μg /mg,USP,BR抗腎小球基底膜試劑盒甘草單鹽;Glycyrrhizic

從化海芽孢桿菌Pontibacillus│chungwhensis 質量規(guī)格：效價測定抗腎小管基底膜抗體試劑盒β-谷甾;β-Sitosterol
中性甲醛鈣固定液MIP-4  人巨噬細胞炎性蛋白-4規(guī)格： 48T

MIP-5  人巨噬細胞炎性蛋白-5規(guī)格： 48T

MCP-1  人巨噬細胞趨化蛋白-1規(guī)格： 48T

MSLN human  人間皮su規(guī)格： 48T

MDA(Human malondialchehyche)  丙二醛(人)規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。