二甲酚橙指示劑

二甲酚橙指示劑公司正在出售的產(chǎn)品：雞Ⅰ型膠原α2(COL1α2)試劑盒 Anti-ATP5F1D Antibody基質(zhì)金屬蛋白酶-1
雞內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒Anti-ATP5MC2 Antibody基質(zhì)金屬蛋白酶-2(多肽抗原)
雞IV型膠原(COL4)試劑盒Anti-ATP5MC3 Antibody基質(zhì)金屬蛋白酶-3(抗原)
雞中性粒激活蛋白3(NAP3)試劑盒Anti-ATP5MF An

產(chǎn)品分類：指示劑

儲(chǔ)存條件：室溫,避光,6個(gè)月

用途：金屬離子指示劑，鈣鎂錳等離子指示劑

注意事項(xiàng)：鈣離子終點(diǎn)顏色變化為：藍(lán)紫色-灰色。鎂離子終點(diǎn)顏色變化為：紅色-淡灰色。錳離子終點(diǎn)顏色變化為：紫色-淡灰色。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

污黑腐皮殼螺旋一環(huán)一螺旋蛋白5抗體Human GPR107 ELISA Kit小鼠白活化黏附因子(ALCAM)免疫試劑盒

綠色鏈霉菌二磷3核苷抗體Human GPR108 ELISA Kit小鼠白三烯E4(LTE4)免疫試劑盒

微小桿菌腦蛋白絲/蘇激29抗體Human GPR116(G-protein coupled receptor 116) ELISA Kit小鼠白三烯D4(LTD4)免疫試劑盒

靈芝智力發(fā)育調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白BRWD3抗體Human GPR123 ELISA Kit小鼠白三烯C4(LTC4)免疫試劑盒

水溶性食用色快速篩查盒生物抗體Human GP repeat ELISA Kit小鼠白三烯B4(LTB4)免疫試劑盒

蟬擬青霉Bax相互作用因子1抗體Human GPAA1 ELISA Kit小鼠白介9(IL-9)免疫試劑盒

高地芽孢桿菌表皮生長(zhǎng)因子反應(yīng)蛋白2抗體Human GPATCH2 ELISA Kit小鼠白介8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒

平菇BCL2相關(guān)X蛋白抗體Human GPBP1 ELISA Kit小鼠白介7(IL-7)免疫試劑盒

蠟樣芽孢桿菌Bcl2樣凋亡蛋白13抗體Human GPATCH4(G patch domain-containing protein 4) ELISA Kit小鼠白介6(IL-6)免疫試劑盒

金黃殼囊孢菌Bcl2樣凋亡蛋白14抗體Human GTF2A2 ELISA Kit小鼠白介-5(IL-5)免疫試劑盒

斑玉蕈Bcl2蛋白修飾因子抗體Human GTF2E1 ELISA Kit小鼠白介4(IL-4)免疫試劑盒

金針菇（毛柄金錢菌、冬菇）骨形態(tài)發(fā)生蛋白11抗體Human GTF2F1 ELISA Kit小鼠白介35(IL-35)免疫試劑盒

大腸埃希菌BCL2樣15促凋亡蛋白抗體Human GSG1L ELISA Kit小鼠白介33(IL-33)免疫試劑盒

藍(lán)色犁頭霉骨堿性磷抗體Human GSDMD ELISA Kit小鼠白介31(IL-31)免疫試劑盒

葡萄座腔菌磷化T淋巴連接蛋白抗體Human GSPT1 ELISA Kit小鼠白介3(IL-3)免疫試劑盒

金耳、 黃木耳磷化T淋巴連接蛋白抗體Human GSPT2 ELISA Kit小鼠白介2受體β(IL2rb/CD122)免疫試劑盒

固氮菌Azotobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格：BRβ膠原交聯(lián)試劑盒人參皂苷Rk3

輪枝孢Verticillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BRβ-肌動(dòng)蛋白試劑盒人參炔

詹氏桿菌Propionibacterium│jensenii 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRβ-黑色激試劑盒肉豆寇單甘油酯
二甲酚橙指示劑SLA(Human Proteinase 3 Antibody) ELISA Kit  人抗肝可溶性抗原規(guī)格： 48T

Human Beta galactan proteins IgG ELISA Kit  人β乳糖蛋白IgG規(guī)格： 48T

EMA IgA(Human Endomysial Antibody IgA) ELISA Kit  人抗肌內(nèi)膜IgA規(guī)格： 48T

GP(Human glycoprotein antibody) ELISA Kit  人抗糖蛋白規(guī)格： 48T

AMA(Human Monocyte antibody) ELISA Kit  人抗單核細(xì)胞規(guī)格： 48T