詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | AATK細胞凋亡關(guān)聯(lián)酪氨酸激酶抗體 |
英文名稱 | AATK |
規(guī)格 | 0.2ml |
?
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
大鼠子宮頸上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基 規(guī)格: 1000ml/瓶 用途: 用于分離和初步鑒別單增李斯特氏菌和其它李斯特菌
BPL瓊脂/BPL Agar食品中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
禽膽鹽/Bile salt from poultryBR25克國產(chǎn)/進口
人單核細胞白血病細胞英文名稱:THP-1
RM-1(小鼠前列腺細胞)5×106cells/瓶×2
MSTO-211H(人肺細胞)5×106cells/瓶×2gersion
小鼠肺大靜脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
煌綠糖膽鹽肉湯/BGLB肉湯/煌綠糖膽鹽增菌液/BGLB Broth用于水樣中大腸菌的檢測250克國產(chǎn)/進口
Poly-D-lysine溶液規(guī)格:2mggersion
小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞英文名稱:DCS
艾格瓊脂/Eugonic Agar過程中無菌監(jiān)測250克國產(chǎn)/進口
SP2/0, 小鼠骨髓瘤細胞
脊椎蛋白1(SPON1)ELISA Kit for Spondin 1 (SPON1)規(guī)格:48T/96T
周期素依賴性激酶抑制因子1A(CDKN1A)ELISA Kit for Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 1A (CDKN1A)規(guī)格:48T/96T
半乳糖-磷尿苷酰轉(zhuǎn)移酶(GALT)ELISA Kit for Galactose-Phosphate Uridylyltransferase (GALT)規(guī)格:48T/96T
D-基氧化酶激活因子(DAOA)ELISA Kit for D-ami Acid Oxidase Activator (DAOA)規(guī)格:48T/96T
酰tRNA合成酶復合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)ELISA Kit for Amiacyl tRNA Synthetase Complex Interacting Multifunctional Protein 1 (AIMP1)規(guī)格:48T/96T
死亡關(guān)聯(lián)蛋白激酶1(DAPK1)ELISA Kit for Death Associated Protein Kinase 1 (DAPK1)規(guī)格:48T/96T
胸腎表達趨化因子(BRAK)ELISA Kit for Breast And Kidney Expressed Chemokine (BRAK)規(guī)格:48T/96T
S100鈣結(jié)合蛋白A5(S100A5)ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A5 (S100A5)規(guī)格:48T/96T
斯鈣素1(STC1)ELISA Kit for Stanniocalcin 1 (STC1)規(guī)格:48T/96T
熱休克蛋白47(HSP47)ELISA Kit for Heat Shock Protein 47 (HSP47)規(guī)格:48T/96T
二基精二水解酶1(DDAH1)ELISA Kit for Dimethylarginine Dimethylamihydrolase 1 (DDAH1)規(guī)格:48T/96T
鹽皮質(zhì)激素受體(MR)ELISA Kit for Mineralocorticoid Receptor (MR)規(guī)格:48T/96T
AATK細胞凋亡關(guān)聯(lián)酪氨酸激酶抗體Rhizoctonia solani提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 用于水稻紋枯病菌的多樣性研究培養(yǎng)基: 14生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Arthrobacter tumbae分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 820生長條件: 29℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Acinetobacter baunannii提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Colletotrichum capsici提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 28℃
Escherichai coli提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
Rhizopus stolonifer (Ehrenb.) Vuill.分離基物: 杏果實提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 26存儲條件: 定期移植法
Stenotrophomonas maltophilia分離基物: 竹簡提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 348生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Corynebacterium glutamicum提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 產(chǎn)谷氨酸,制味精。培養(yǎng)基: CM0389生長條件: 28-30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus thuringiensis提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 蘇云金芽孢桿中國亞種(B.t subsp. sinensis)的標準?/td>培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法