EA50染色液

EA50染色液公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：豚鼠胸腺肽β10(TMSβ10)試劑盒Anti-MDK Antibody低密度脂蛋白受體抗體
豚鼠IV D組磷脂酶A2(PLA2G4D)試劑盒Anti-MDM2 Antibody神經(jīng)視錐蛋白樣1抗體(神經(jīng)鈣蛋白)
豚鼠促紅生成素(EPO)試劑盒Anti-MDC1 Antibody轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白2抗體
豚鼠煙酰腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)試劑盒An

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢(xún)并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類(lèi)：細(xì)胞染色

儲(chǔ)存條件：室溫,12個(gè)月

用途：細(xì)胞學(xué)樣本常規(guī)染色,尤其適用于婦科細(xì)胞學(xué)涂片染色、細(xì)胞脫落標(biāo)本染色。

注意事項(xiàng)：巴氏染色液的一種主要成分,主要由亮綠、磷鎢酸等組成。OG6與EA50聯(lián)合使用,可以將細(xì)胞漿染成鮮明的綠色、藍(lán)色、粉色。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線(xiàn)，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

款冬（標(biāo)準(zhǔn)品） Celite, acid-washedG蛋白偶聯(lián)受體109A抗體包裝5g

葵花盤(pán)（標(biāo)準(zhǔn)品） Celite® 545γ-銜接蛋白相關(guān)蛋白1抗體包裝1g

昆明山海棠（標(biāo)準(zhǔn)品） Chlorhexidineγ-銜接蛋白相關(guān)蛋白2抗體包裝25g

蠟梅堿  β-Citronellolγ-銜接蛋白相關(guān)蛋白3抗體包裝5g

,辣椒(天然提取) Carbendazim solution配子生成抗體包裝1g

,辣椒（天然提取標(biāo)準(zhǔn)品） Carbendazim solutionγ谷酰轉(zhuǎn)肽2重鏈抗體包裝250mg

辣蓼（標(biāo)準(zhǔn)品） Chryseneγ-谷酰轉(zhuǎn)肽5重鏈抗體包裝5g

萊苞迪甙A（標(biāo)準(zhǔn)品） Carbaryl磷化GATA結(jié)合蛋白3抗體包裝100mg

萊苞迪甙C（標(biāo)準(zhǔn)品） Chlorpyrifos磷化GATA結(jié)合蛋白3抗體包裝500mg

萊苞迪甙D（標(biāo)準(zhǔn)品） Cyromazin solution延伸因子G2抗體包裝1g

萊苞迪苷G Clofentezine葡糖淀粉抗體包裝25g

萊菔子（標(biāo)準(zhǔn)品） Clofentezine solution谷酰6-磷果糖轉(zhuǎn)移抗體包裝5g

蘭雪醌,白花丹醌,白花丹(標(biāo)準(zhǔn)品) Clofentezine solutionS轉(zhuǎn)移θ抗體包裝100mg

藍(lán)布正（標(biāo)準(zhǔn)品） CarboxineS轉(zhuǎn)移θ2抗體包裝25mg

欖香 Cyclohexanolγ-谷酰轉(zhuǎn)肽6抗體包裝25g

: AS2.126資源名稱(chēng): 釀酒酵母 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品橋粒芯糖蛋白3抗體試劑盒泊金;Propylparaben

副溶血弧菌Vibrio│parahaemolyticus 質(zhì)量規(guī)格：Purity>99.0%;蕈堿型乙酰受體拮抗劑橋粒芯糖蛋白2試劑盒泊金乙;Ethylparaben

尖鐮孢古巴專(zhuān)化型（香蕉枯萎病菌）Fusarium│oxysporum f. sp. cubense 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品橋粒芯糖蛋白1抗體試劑盒泊金;Methylparaben
EA50染色液Mac-1 (Mac-1/CR3/CD11b+CD18)  巨噬細(xì)胞表面分子抗原規(guī)格： 0.5mg

Mafa(avian)(V-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog A)  v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗原規(guī)格： 0.5mg

MAGE-1 gen (Melanoma gen Recognized by T-cells 1)  黑色su瘤相關(guān)抗原規(guī)格： 0.5mg

MAPKK1 (MAP kinase kinase 1)  絲裂原活化蛋白激mei激mei1抗原規(guī)格： 0.5mg

ASK1/MAPKKK5  細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激mei1/絲裂原活化蛋白激mei激mei激mei5抗原規(guī)格： 0.5mg

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線(xiàn)，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線(xiàn)的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（劑量反應(yīng)曲線(xiàn)）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。