詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
產品名稱 | 醛縮酶2抗體 |
英文名稱 | ALDOB |
規(guī)格 | 0.1ml |
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公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
2,4,5,6四氨基嘧啶鹽(≥98.0%) 進口/國產 規(guī)格:≥98.0%純度:≥97%
煙(99%) 進口/國產 規(guī)格:0.99純度:90%
N基N(三基硅基)乙酰(97%) 進口/國產 規(guī)格:0.97純度:90%
苔黑一水合物(98%) 進口/國產 規(guī)格:0.98純度:95% 98%
1(三氟乙酰)咪唑(用于GC衍生化,≥98.5%) 進口/國產 規(guī)格:用于GC衍生化,≥98.5%純度:≥99%
2,3二溴丙酰(98%) 進口/國產 規(guī)格:0.98純度:≥95%
滑石粉(800目) 進口/國產 規(guī)格:800目純度:95%
滑石粉(藥用級,325目) 進口/國產 規(guī)格:藥用級,325目純度:≥95%
硼砂pH標準物質(硼砂PH(25℃):9.18) 進口/國產 規(guī)格:硼砂PH(25℃):9.18純度:≥95%
3氧芐(98%) 進口/國產 規(guī)格:0.98純度:≥95%
果膠(半乳糖醛(干基計)≥74.0 %) 進口/國產 規(guī)格:半乳糖醛(干基計)≥74.0 %純度:≥98%
三丁(AR,99%) 進口/國產 規(guī)格:AR,99%純度:≥98%
三丁(CP) 進口/國產 規(guī)格:CP純度:≥97%
三丁(標準品) 進口/國產 規(guī)格:分析標準品純度:≥98%
皂土(膨潤土)(Bentone SD1,適于中至低性溶劑) 進口/國產 規(guī)格:Bentone SD1,適于中至低性溶劑純度:≥98%
皂土(膨潤土)(Bentone SD2,適于中高性溶劑) 進口/國產 規(guī)格:Bentone SD2,適于中高性溶劑純度:98%
CDC2L6 細胞分裂周期2樣蛋白激酶6一抗 * 0.2ml Ligustrazine HCl
Hrk/BCL2 interacting protein BCL2相互作用蛋白質一抗 * 0.2ml Cephalexin
IKB zeta/MAIL protein KB抑制蛋白激酶Ζ一抗 * 0.2ml Cephalexin
NME5/IPIA beta P53誘導細胞凋亡抑制蛋白一抗 * 0.2ml Gibberellic acid(GA3 )
xa xa蛋白一抗 * 0.2ml Chloramphenicol
phosphoRKIP (Ser 153) 化Raf激酶抑制蛋白一抗 * 0.1ml Chloramphenicol
BMP11 骨形態(tài)發(fā)生蛋白11一抗 * 0.2ml Chloramphenicol
RERE 肌相關蛋白1一抗 * 0.2ml Sodium ferulic
醛縮酶2抗體Hib乙酰輔酶A水解酶抗體4-Epicommunic acid中文名:別名:Labda-8(17),12E,14-trien-18-oic acid分子式:C20H30O2
腫瘤異常甲基化蛋白1抗體Dihydroajugapitin中文名:別名:分子式:C29H44O10
腫瘤異常甲基化蛋白2抗體Scoparil中文名:別名:Scopadiol分子式:C27H38O4
缺氧誘導因子脯氨酰羥化酶4抗體Deacetylxylopic acid中文名:別名:ent-15-Hydroxykaur-16-en-19-oic acid分子式:C20H30O3
缺氧誘導基因2蛋白抗體ent-11α,16α-Epoxy-15α-hydroxykauran-19-oic acid中文名:別名:分子式:C20H30O4