HEK-293A人胚腎細(xì)胞

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一、細(xì)胞基本屬性

培養(yǎng)基:DMEM+10% FBS+1%雙抗

倍增時間:~40-60 hours

幾種常見細(xì)胞系：

永生化細(xì)胞系

永生化細(xì)胞指動物細(xì)胞脫分化失敗，受到病毒感染，外源惡意代碼轉(zhuǎn)染，輻射或藥劑作用后，細(xì)胞分裂次數(shù)限制機(jī)制和DNA檢查-自毀機(jī)制失靈，導(dǎo)致具有無限分裂生長的能力的細(xì)胞。在生物學(xué)研究領(lǐng)域有著極為廣泛的應(yīng)用。

人源細(xì)胞系

這些細(xì)胞的是來源于人體的某一類細(xì)胞，包括正常細(xì)胞，瘤細(xì)胞和癌細(xì)胞。利用人的細(xì)胞對某一抗原研究，可以直觀的得到真實(shí)可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

癌細(xì)胞系

癌細(xì)胞是一種變異的細(xì)胞。是產(chǎn)生癌癥的病源，癌細(xì)胞與正常細(xì)胞不同，有無限增殖、可轉(zhuǎn)化和易轉(zhuǎn)移三大特點(diǎn)，能夠無限增殖并破壞正常的細(xì)胞組織。癌細(xì)胞除了分裂失控外，還會局部侵入周遭正常組織甚至經(jīng)由體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到身體其他部分。

瘤細(xì)胞系

瘤細(xì)胞也稱腫瘤細(xì)胞，分為惡性和良性兩種．是動物體中正在發(fā)育的和已經(jīng)成熟的細(xì)胞，在不同因素長期作用下，出現(xiàn)過度喪生和異常分化而形成的新生物，與正常組織和細(xì)胞不同，不按細(xì)胞的正常新陳代謝規(guī)律生長，而變的不受約束和控制，并呈無規(guī)律的迅速生長，以至可以破壞正常組織器官的結(jié)構(gòu)并影響其功能。

大鼠細(xì)胞系

這些細(xì)胞的生物體來源是大鼠，在生物學(xué)研究中，由于大鼠細(xì)胞與人類細(xì)胞具有很大的相似性，且較人類細(xì)胞更為敏感，因此常用大鼠細(xì)胞來代替人細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

小鼠細(xì)胞系

這些細(xì)胞是來源于小鼠細(xì)胞，對于一些傳染類疾病（如沙門氏桿菌?。撕蛣游锒季哂懈腥拘?，但小鼠繁殖快，細(xì)胞敏感性高。因此通過對小鼠細(xì)胞來代替人類細(xì)胞對這些致病因子進(jìn)行研究，效果會更好。

進(jìn)行細(xì)胞系鑒定通常使用多種方法和技術(shù)，以確保細(xì)胞系的身份和純度。

常見的細(xì)胞系鑒定方法：

1. 形態(tài)學(xué)觀察：通過顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)特征和細(xì)胞增殖方式，可以初步鑒定細(xì)胞系的類型。不同類型的細(xì)胞具有特定的形態(tài)學(xué)特征，如細(xì)胞形狀、大小、核形態(tài)等。

2. 免疫細(xì)胞化學(xué)染色：使用特異性抗體對細(xì)胞進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)染色，可以檢測細(xì)胞表面或細(xì)胞內(nèi)的特定標(biāo)志物。這可以確定細(xì)胞的來源、表型和功能。
3. 遺傳標(biāo)記分析：通過檢測細(xì)胞的遺傳標(biāo)記物，如染色體數(shù)目、染色體結(jié)構(gòu)、單核苷酸多態(tài)性（SNP）等，來鑒定細(xì)胞系。常用的方法包括核型分析、熒光原位雜交（FISH）等。

4. STR分型（短串聯(lián)重復(fù)分型）：STR是一種DNA序列重復(fù)的片段，通過PCR擴(kuò)增和電泳分析可以確定細(xì)胞的DNA指紋圖譜。與已知的細(xì)胞系或數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對，可以判斷細(xì)胞系的身份和純度。

5. DNA測序：對細(xì)胞系的基因組進(jìn)行全面的DNA測序，可以提供詳細(xì)的遺傳信息，并與已知的基因組數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對，以確定細(xì)胞系的身份。

6. 同質(zhì)性檢測：通過細(xì)胞間克隆性和同質(zhì)性的評估，確定細(xì)胞系是否具有單一來源。常用的方法包括限制性酶切位點(diǎn)多態(tài)性分析（RFLP）、單倍型分析等。

7. 人源檢測：對于人類細(xì)胞系，可以使用人類特異性標(biāo)記物的PCR擴(kuò)增和測序來確認(rèn)其人類來源。

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