脂肪炎癥因子Apelin抗體

抗體制備過程：
1.材料與試劑
  a．提取的動(dòng)物 Ig
  b．弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
  c．青霉素和鏈霉素
  d．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
  e．其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，殺死實(shí)驗(yàn)活體，采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清（無菌采制）
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體，抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品，產(chǎn)品品質(zhì)，價(jià)格實(shí)惠，多種規(guī)格供應(yīng)，售后完善。

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抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存?？贵w一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程：
1. 免疫原：普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物：常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集：一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定：得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存：抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù)：
（一）原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
（二）準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應(yīng)終止緩沖液；
2.儀器
凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。
（三）操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行；
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
E64d,蛋白酶抑制劑,阿洛司他丁   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>98%,BR純度：≥97%

2’脫氧胞苷5‘二鈉鹽   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>98%，BR純度：≥97%

dAMP;2’脫氧腺苷5‘單   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>99%,BR純度：≥97%

黃素腺嘌呤二核苷二鈉鹽   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：BR,羅氏進(jìn)分純度：≥98%

GTP;鳥苷5‘三鈉鹽   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>90%,分子生物學(xué)級純度：≥98%

肌苷5’二鈉鹽   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>98%,BR純度：≥95%

尿苷5’二鈉鹽(UDP)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>98%,BR純度：98%

5’尿苷二鈉(UMP)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>99%,BR純度：≥95%

dAMPNa2;脫氧腺苷二鈉   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>98,BR純度：95%

ATP.Na2; 腺苷5’三二鈉鹽水合物   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng),三水合物純度：95%

阿帕替尼鹽   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>98%,VEGFR2選擇性抑制劑純度：≥98%

cAMP;環(huán)腺苷,環(huán)腺苷,環(huán)腺苷   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>98%,BR純度：≥97%

環(huán)腺苷,環(huán)腺苷(標(biāo)準(zhǔn)品)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品純度：≥97%

5'胞苷(CMP)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>95%,BR純度：≥97%

5酰水楊   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>97%純度：≥97%

D核糖5二鈉鹽   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>85%,美國進(jìn)口純度：≥98%

WAPL  EBV核蛋白2一抗    * 0.2ml Sodium phosphate, dibasic, heptahydrate

CAPD3/hCAPD3  濃縮素2復(fù)合亞基D3一抗    * 0.2ml dATP 100 mM solution

AMSH  信號轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白一抗    * 0.2ml Sodium decaate

ASB3  錨蛋白重復(fù)序列細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族3一抗    * 0.2ml Agarose

EIF2C1/Ago1  真核翻譯起始因子2C1一抗    * 0.2ml Agarose

Anillin  胞環(huán)蛋白肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白一抗    * 0.2ml Phytohemagglutinin

BIN3  細(xì)胞骨架銜接蛋白BIN3一抗    * 0.2ml Kinetin,6Furfurylamipurine

CCDC11  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白11一抗    * 0.2ml EGTA, egtazic acid
脂肪炎癥因子Apelin抗體小鼠膽囊上皮細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠肺成纖維細(xì)胞，MPF細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠肺大動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠肺巨噬細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶