鄰甲酚酞指示劑

鄰甲酚酞指示劑公司正在銷售的產(chǎn)品：雞纖維蛋白原γ(FGγ)試劑盒Anti-WNT3A AntibodyAlexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗大鼠IgM
雞43KDa Tar DNA結(jié)合蛋白(TDP43)試劑盒Anti-WNT4 AntibodyPE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗大鼠IgM
雞卵泡受體(FSHR)試劑盒 Anti-WNT5A AntibodyAPC標(biāo)記的兔抗大鼠IgM
雞煙酰腺嘌呤二核苷酸

產(chǎn)品分類：指示劑

儲存條件：室溫,避光,12個月

用途：單一酸堿指示劑

注意事項(xiàng)：鄰甲酚酞變色范圍：pH8.2-9.8,顏色由無色變紅色。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

 

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

黑曲霉APP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體Human LRCH1 ELISA Kit豬巨噬遷移抑制因子(糖基化抑制因子)(MIF)免疫試劑盒

*蟲擬蠟菌甲胎蛋白單克抗體（包被）Human LPXN ELISA Kit豬金屬硫蛋白(MT)免疫試劑盒

瓦克青霉甲胎蛋白單克抗體(檢測)Human LRAT ELISA Kit豬結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)免疫試劑盒

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Bacillus 芳香烴受體抗體Human LMF2 ELISA Kit豬角化生長因子(KGF)免疫試劑盒

嗜鹽堿堿芽孢桿菌吸引抗體Human LIN28B ELISA Kit豬降鈣原(PCT)免疫試劑盒

球孢白僵菌腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗體Human LITAF ELISA Kit豬降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)免疫試劑盒

柔嫩艾耳球蟲蛋白激B2Human LIN7B(Protein lin-7 homolog B) ELISA Kit豬堿性成纖維生長因子(bFGF)免疫試劑盒

平菇血管生成2抗體Human Liprin alpha 1 ELISA Kit豬甲狀腺(T4)免疫試劑盒

金針菇芳香化/色P450/雌激合成抗體Human LIV-1 ELISA Kit豬低密度脂蛋白(VLDL)免疫試劑盒

釀酒酵母腺苷A2A受體抗體Human LIN28B ELISA Kit豬激敏感性脂肪(HSL)免疫試劑盒

尖孢鐮刀菌蛋白激A錨定蛋白95抗體Human LMBR1L ELISA Kit豬激動異構(gòu)/分裂MB(CKMB)免疫試劑盒

曲霉頂膜鈉依賴性膽鹽轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白抗體Human LMF2 ELISA Kit豬基質(zhì)衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)免疫試劑盒

*樺褐孔菌去整合樣金屬蛋白8抗體Human LIN7A ELISA Kit豬基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)免疫試劑盒

狀鞘單胞菌芳香乙酰脫乙?；鶚拥鞍?/span>3抗體Human LIN7B(Protein lin-7 homolog B) ELISA Kit豬基質(zhì)金屬蛋白9(MMP-9)免疫試劑盒

三孢布氏霉ACN9蛋白抗體Human LHPP ELISA Kit豬基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒

榛針孢酵母Nematospora│coryli 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 補(bǔ)體蛋白9試劑盒紫莖女貞苷A

阮繼生氏菌Ruania│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR補(bǔ)體蛋白5試劑盒正丁

pr1.01739資源名稱: 皮氏羅爾斯通氏菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC 補(bǔ)體蛋白4試劑盒梓
鄰甲酚酞指示劑TLa(Human thymus-leukemia antigen) ELISA Kit  人胸腺白血病抗原規(guī)格： 48T

TSTA(Human tumor specific transplantation antigen) ELISA Kit  人腫瘤特異性移植抗原規(guī)格： 48T

PCX(Human Podocalyxin) ELISA Kit  人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白/足盂蛋白規(guī)格： 48T

BRCA-1(Human breast cancer susceptibility protein 1) ELISA Kit  人癌易感蛋白1規(guī)格： 48T

TALLA-1/CD231(Human T-cell acute lymphoblastic leukemia antigen) ELISA Kit  人T細(xì)胞急性淋巴母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原規(guī)格： 48T