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告別2015,迎接2016年,春節(jié)過去了,天氣也越來越熱起來,那么越是到炎熱的時候,越是聽到實驗室老師的埋怨,細胞總是污染,我該怎么辦?現(xiàn)在慧穎細胞庫技術來幫各位老師分析下原因,以及解決辦法。
細胞污染可能原因:
1.天氣太熱,實驗者在培養(yǎng)和接種或者換液時出汗(有空調稍好,但是手也出汗)。
2.培養(yǎng)間里可能暗藏污染原。
3.注意培養(yǎng)箱(這點zui重要),仔細檢查培養(yǎng)箱里的隔板的下面,有可能有霉菌斑。(我以前遇到過)
4.培養(yǎng)基污染多數(shù)是配置過程中造成的,仔細檢查配置過程用到的器具。
5.血清過期一個月,如果保存的好應該沒有問題,但是保存不好,新來的血清,用一次就可能污染。血清過期和污染是否有必然的不好說,我們覺得不大。
解決辦法:
1.*清潔培養(yǎng)間,顯微鏡室。然后,紫外燈多照射一端時間消毒空氣。
2.*清潔培養(yǎng)箱:(1)每個隔板仔細清洗,火烤。(2)培養(yǎng)箱大換水,換成新鮮干凈的蒸餾水。(3)培養(yǎng)箱內壁用酒精棉球或者稀過氧乙酸認真擦洗。(4)紫外燈長時間照射(一天)。
3.實驗用器械消毒:注意消毒時間和壓力,有必要檢查壓力鍋和校正壓力表是否準確。
4.一次性手套在打開使用前一天放入無菌間照射消毒。
5.如果用雙抗,應該現(xiàn)用現(xiàn)配。
6.注意過濾器的消毒滅菌。
7.經驗告訴我們過期1年內的血清,只要保存妥當,其實血清的效價是不會降低的;還有剛購買的大規(guī)格的血清收到后,避免反復凍融,血清分裝的時候要無菌分裝,轉入無菌間,在超凈臺內將血清分裝入50-100ml血清瓶中封口,并于-20℃保存?zhèn)溆?。分裝時注意:① 預先要將血清輕輕搖動數(shù)周、混勻;② 用吸液管吹出血清時要注意:③ 不要吹出氣泡,血清很粘稠,很容易產生氣泡。如果產生氣泡,則在酒精燈火焰上過一下?;鄯f生物作為國內幾大動物血清供應商之一,凡購買我司血清,我們會按照老師要求規(guī)格免費幫老師分裝好后凍存運輸。
8.檢查培養(yǎng)間和超凈臺的通風過濾網,如果臟了,需要更換。
總之,潮濕悶熱天氣培養(yǎng)細胞非常容易污染,必須注意每一個環(huán)節(jié)。具體的可能造成污染的環(huán)節(jié),還得要自己體會查找。
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