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35.1細(xì)胞

時(shí)間:2016-5-18閱讀:1249

35.1細(xì)胞

一、細(xì)胞凍存:


1.  錯(cuò)誤的時(shí)機(jī):
細(xì)胞狀態(tài)不好(長的太過了,培養(yǎng)液已經(jīng)很黃;細(xì)胞可疑污染;細(xì)胞已 經(jīng)開始凋亡或崩解;連續(xù)培養(yǎng)超過二個(gè)月,細(xì)胞性狀已有改變改變)。


解決:
*時(shí)機(jī):細(xì)胞增殖旺盛,情況穩(wěn)定,試驗(yàn)效果良好,復(fù)蘇后兩周內(nèi)。


2.  細(xì)胞太少:

凍存時(shí)細(xì)胞濃度低于1-5×1000,000/ml。(復(fù)蘇很難成功)。


解決:
離心后調(diào)整細(xì)胞濃度。(不要重新洗細(xì)胞)。


3.  蓋子不緊:

凍存管的蓋子一定要擰緊,否則復(fù)蘇水浴時(shí)會(huì)滲水,造成污染。


解決:
選擇原配的管子和蓋子(不同牌子/型號(hào)的顏色會(huì)有差別)。


4.  單薄的凍存盒:

放在-80度的凍存盒,壁太薄,細(xì)胞在被迅速降溫。


解決:
選擇厚壁泡沫塑料盒,或塞入大量干棉花。(凍存的原則:緩降?。?/span>

 

5.  -80度太久:

放在-80度冰箱的時(shí)間超過半年。(冰箱的溫度難以恒定:開門/關(guān)門,電壓不穩(wěn)等)


解決:
盡快轉(zhuǎn)入液氮。

 

6.  液氮不足:

液面不能漫過所有細(xì)胞。


解決:
定期測(cè)量液氮儲(chǔ)備,保證細(xì)胞全部浸在液面下。

 

7.  取錯(cuò)細(xì)胞:

找不到/拿錯(cuò)凍存管。


解決:
每支凍存管都標(biāo)上細(xì)胞的名稱,凍存時(shí)間,并記錄在冊(cè)。

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293 [HEK-293]    人胚腎細(xì)胞
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293ebna    人胚腎細(xì)胞
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雜交瘤細(xì)胞抗AChE
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狀腺癌細(xì)胞(未分化)

 

 

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