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Schiff 試劑 使用說明
最近更新時(shí)間:2016-4-13
提 供 商:北京諾博萊德科技有限公司資料大?。?/span>7.5KB
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
Schiff試劑又稱雪夫試劑、希夫試劑等,是Schiff于1866年發(fā)現(xiàn)的一種有效的醛試劑,用于檢測(cè)醛基(-CHO)。Schiff試劑主要成分是副品紅堿,為三氨基三苯甲烷的氯化物,其中的醌基是品紅顯色原因。在酸化的品紅液中加入亞硫酸或者亞硫酸鹽,品紅被還原為品紅-亞硫酸(或稱白亞磺酸),即Schiff試劑。
NobleRyder Schiff試劑主要用于糖原、黏液物質(zhì)等染色,常與過碘酸(也稱高碘酸)配合使用,過碘酸是一種強(qiáng)氧化劑,它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎?,醛與Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色。配制好的Schiff試劑接近于無色。
產(chǎn)品組成:
編號(hào) 名稱 | D7804 | D7804 | Storage |
50ml | 100ml | RT避光 | |
使用說明書 | 1份 |
自備材料:
1、10%福爾馬林固定液
2、蒸餾水
3、過碘酸溶液
4、蘇木素染色液,
5、酸性乙醇分化液
6、系列乙醇
操作步驟(僅供參考):
1、常規(guī)固定,常采用10%的福爾馬林,常規(guī)脫水包埋。
2、石蠟切片脫蠟入蒸餾水;冰凍切片直接入蒸餾水。
3、自來水沖洗2~3min,再用蒸餾水浸洗2次。
4、切片入過碘酸溶液,室溫放置5~8min,一般不宜超過10min。
5、自來水沖洗1次,再用蒸餾水浸洗2次。
6、切片入Schiff Reagent,室溫陰暗處浸染10~20min。
7、自來水沖洗10min。
8、入蘇木素染色液,染細(xì)胞核1~2min。
9、酸性乙醇分化液分化2~5s。
10、自來水沖洗10~15min后,更換蒸餾水清洗使其返藍(lán)。
11、逐級(jí)常規(guī)乙醇脫水。二甲苯透明,中性樹膠封固。
染色結(jié)果:PAS反應(yīng)陽(yáng)性物質(zhì)(糖原或多糖)呈紅色或紫紅色。
陰性對(duì)照(可選):
1、取淀粉酶1g溶解于PBS(pH5.3)100ml,處理30~60min,與其他切片共同入過碘酸溶液,結(jié)果應(yīng)為陰性。
2、(備選方案)取唾液片(過濾后用)處理30~60min,與其他切片共同入過碘酸溶液,結(jié)果應(yīng)為陰性。
3、(備選方案)如果對(duì)照片采用其自身樣本,對(duì)照片不經(jīng)過碘酸溶液這一步,直接入Schiff Reagent。結(jié)果應(yīng)為陰性。
注意事項(xiàng):
1、Schiff Reagent應(yīng)置于4℃密閉保存,使用時(shí)避免接觸過多陽(yáng)光和空氣。在室溫過低(小于15℃)情況下反應(yīng)緩慢,可以置于適宜溫水(小<30℃)中恢復(fù)后再使用。
2、理想的Schiff Reagent接近于無色,如果試劑顏色呈極輕微粉紅色亦可考慮使用。如試劑顏色呈明顯的紅色應(yīng)棄用。
3、顏色深淺很大程度上取決于樣品在過碘酸溶液和
中作用時(shí)間的長(zhǎng)短。
4、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期:6個(gè)月有效。
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