蛋白酶K，羅氏蛋白酶K

羅氏蛋白酶K說明：枯草蛋白酶類高活性蛋白酶，生物實驗室常用酶之一。該酶在較廣的pH范圍內(nèi)（pH4-12.5）均有活性。用于mRNA和DNA與蛋白質(zhì)的分離。
CAS＃：39450-01-6
外觀：凍干粉
蛋白酶K，羅氏蛋白酶K特性：活性：>30U/mg
          溶解性：用滅菌的50mmol/L Tris-Hcl（pH8.0），1.5mmol/l乙
           酸鈣溶解，配制成濃度為20mg/ml的溶液。一般為了使用
           方便，可用50%的溶解成10mg/ml,存放于-20℃
           R：36/37/38-42     S：22-24-26-36/37
儲存條件：-20℃               
如果沒有特別說明，此產(chǎn)品是不要用PBS去溶解，因為部分廠家產(chǎn)品含有鈣，用PBS溶解時分產(chǎn)生沉淀。
蛋白酶k是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶，用于生物樣品中蛋白質(zhì)的一般降解。從林伯氏白色念球菌（tritirachium album limber）中純化得到。該酶有兩個ca2 結(jié)合位點，它們離酶的活性中心有一定距離，與催化機理并無直接關(guān)系。然而，如果從該酶中除去ca2 ，由于出現(xiàn)遠程的結(jié)構(gòu)變化，催化活性將喪失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情況下污染酸制品的蛋白質(zhì)。所以，蛋白酶k消化過程中通常加入edta（以抑制依賴于mg2 的核酸酶的作用）。但是，如果要消化對蛋白酶k具有較強耐性的蛋白，如角蛋白一類，則可能需要使用含有1mmol/l ca2 而不含edta的緩沖液。在消化完畢后、純化核酸前要加入EGTA（ph8.0）至終濃度為2mmol/l,以鰲合ca2 。 　　蛋白酶K，是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。此酶經(jīng)純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中穩(wěn)定，還具有降解天然蛋白質(zhì)的能力，因而它應(yīng)用很廣泛，包括制備脈沖電泳的染色體DNA，蛋白質(zhì)印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作濃度是50—100μg/ml。在較廣的pH范圍內(nèi)（pH 4-12.5）均有活性。 　　推薦反應(yīng)緩沖液：50mM Tris-HCl （pH7.5）,10mM CaCl2 。

蛋白酶K，羅氏蛋白酶K