Lowry法蛋白濃度測定試劑盒 NobleRyder P0040

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Lowry法蛋白濃度測定試劑盒
          

本試劑盒自訂購之日起一年內有效。本試劑盒用于酶標板或者200ul比色皿時可做1000孔。當使用2ml比色皿時可做100孔，如果是1ml比色皿時可做200孔。

產品簡介

Folin-酚試劑法包括兩步反應：*步是在堿性條件下，蛋白質與銅作用生成蛋白質-銅絡合物；第二步是此絡合物將Folin試劑還原，產生深藍色，顏色深淺與蛋白質含量成正比。定量范圍為5～100μg/ml蛋白質。Folin試劑顯色反應由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起，因此樣品中若含有酚類、檸檬酸和巰基化合物均有干擾作用。此外，不同蛋白質因酪氨酸、色氨酸含量不同而使顯色強度稍有不同。

使用說明

一，酶標儀法

1.         根據(jù)需要量，將Folin酚甲試劑A和Folin酚甲試劑B按50：1混合，其有效期為24小時，過期失效。

2.         稀釋標準品：取10微升BSA標準品用PBS稀釋至100微升（標準品一般可用PBS稀釋），使終濃度為0.5mg/ml。將標準品按0, 2, 4，6，8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白標準品孔中，加PBS補足到20微升。

3.         將樣品作適當稀釋（多做幾個梯度，如作2倍、4倍、8倍稀釋），加20微升到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量時的誤差，標準線前面的點可能不很準確，所以盡可能的讓樣品點落在標準線1/2后。

4.         將配好的Folin酚甲試劑每孔加入200微升，輕輕震動，混勻，室溫放置10分鐘。

5.         各孔加入20微升Folin酚乙試劑，迅速混勻，37℃放置30分鐘。用酶標儀測定A650，根據(jù)標準曲線計算出蛋白濃度。

6.         使用溫箱孵育時，應注意防止因水粉蒸發(fā)影響檢測結果。

二，分光光度計法

如沒有酶標儀，可用分光光度計在離心管中混勻后加入比色皿中比色。步驟如下：

1． 根據(jù)需要量，將Folin酚甲試劑A和Folin酚甲試劑B按50：1混合，其有效期為24小時，過期失效。

2． 稀釋標準品：取10微升BSA標準品用PBS稀釋至100微升（標準品一般可用PBS稀釋），使終濃度為0.5mg/ml。

3． 取八支（或者更多）5ml離心管，標讓號，按下表加入試劑。

4．混勻，37℃放置30分鐘。用分光光度計測定A650

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Lowry法蛋白濃度測定試劑盒 NobleRyder P0040