腹瀉性貝類毒素檢測試劑盒檢測原理
閱讀:227 發(fā)布時間:2022-11-1
腹瀉性貝類毒素檢測試劑盒直接競爭性酶聯(lián)免疫原理檢測樣品中的岡田酸。微孔中包被有羊抗兔岡田酸抗體(二抗)。標準品/樣品中的岡田酸與岡田酸酶標物競爭岡田酸抗體上的結(jié)合位點,加入包被二抗的微孔中后,岡田酸抗體與二抗結(jié)合。孵育后洗滌微孔。然后加入底物試劑,與岡田酸酶標物發(fā)生反應,使溶液變?yōu)樗{色,加入終止液后,溶液由藍色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。在450nm處測量吸光值,將未知樣品的吸光值與標準品的吸光值相比,即可得到樣品中岡田酸的濃度。吸光值與樣品中岡田酸的濃度成負相關。
利用萃取液通過均質(zhì)及振蕩的方式提取樣品中的腹瀉性貝類毒素,再用緩沖液稀釋,然后進行免疫測定。先將酶標記物加入到微孔中,再加入標準及樣品,然后加入抗體進行反應。孵育30分鐘后洗掉小孔中所有沒有結(jié)合的分子。加入無色的底物溶液,培養(yǎng)30分鐘,所有結(jié)合的酶標記物使底物轉(zhuǎn)化成藍色物質(zhì)。加入停止液然后讀取吸光度值,將未知濃度樣品與標準吸光度值進行比較,就可以得到樣品中腹瀉性貝類毒素的濃度值。
腹瀉性貝類毒素檢測試劑盒檢測原理:
測定的基礎是抗原抗體反應,微孔板包被有針對腹瀉性毒素(DSP)抗體的捕捉抗體,加入標準或樣品溶液及腹瀉性毒素(DSP)酶標記物,游離腹瀉性毒素(DSP)與腹瀉性毒素(DSP)酶標記物競爭腹瀉性毒素(DSP)抗體,同時腹瀉性毒素(DSP)抗體與捕捉抗體連接。沒有結(jié)合的酶標記物在洗滌步驟中被除去。將底物和發(fā)色劑加入到孔中并且孵育。結(jié)合的酶標記物將無色的發(fā)色劑轉(zhuǎn)化為藍色的產(chǎn)物。加入反應停止液后使顏色改變。在450nm測量,吸光度與樣品中的濃度成反比。