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酶標儀的靈敏度和準確度監(jiān)測方法分享

閱讀:2541發(fā)布時間:2021-5-26

  酶標儀主要應用于生物教學、科研、實驗等領域。適合微生物、動植物、食品檢驗等實驗分析,也非常適合基層醫(yī)院臨床檢測使用。 該儀器檢測自動化,智能化,適合批量樣品數(shù)據(jù)檢測。人機交互性能好。操作使用簡便。精度高,穩(wěn)定度好,特別適合低刻度、小劑量的分子生物領域檢測使用。
 
  酶標儀的理論基礎:
 
  酶標儀的濾光片質(zhì)量好壞,直接影響儀器的靈敏度高低,而濾光片的質(zhì)量又是以其波長精度及其峰值指標來衡量的,因此濾光片波長精度及峰值是衡量酶標儀的重要參數(shù)之一,這在廠家的儀器說明書中雖未曾提及,但在儀器的實際使用過程中,我們發(fā)現(xiàn)對濾光片波長精度和峰值進行檢查是重要的也是必要的,通過檢查可以發(fā)現(xiàn)濾光片的波長標定值與實測值的符合程度,可以發(fā)現(xiàn)濾光片的質(zhì)量是否符合要求。
 
  酶標儀的靈敏度和準確度的監(jiān)測
 
  方法:①靈敏度:準確配制6ug/ml重鉻酸鉀(干燥)溶液(0.05mo1/L硫酸溶解),加入200ul重鉻酸鉀溶液于小孔杯中,以0.05mo1/L硫酸溶液作空白,于450nm(參比波長650nm)測定,其吸光度應≥0.01A。②準確度:準確配制:1mmo/L對硝基苯酚(提純品)水溶液,然后以10mmo1/L氫氧化鈉溶液25倍稀釋之,加入200ul稀釋液于小孔杯中,以10mmo1/LNaOH溶液作空白,于405nm(參比波長650nm)檢測,其吸光度應在0.4A(0.395~0.408A)左右。
 
  說明:儀器的靈敏度和準確度主要受兩個因素影響:一是濾光片波長的精度,二是檢測器的質(zhì)量。通常情況下,濾光片原因?qū)е聝x器的靈敏度和準確度下降比較容易檢查;而檢測器質(zhì)量差異則不易被發(fā)現(xiàn),因此我們采用上述兩種標準物質(zhì)溶液對儀器檢測器的質(zhì)量進行定期監(jiān)測,從而保證了儀器檢測結(jié)果的可靠性。對于儀器準確性的測定,我們采用了文獻報道的方法,經(jīng)過多次在不同型號儀器間進行反復測定,結(jié)果發(fā)現(xiàn)該標準物溶液在450nm波長處有一較為恒定的測定值,由于酶標儀與其它分光光度計的光學原理不*相同,故是否可以作為評價酶標儀準確性的參考方法還有待同行進一步研究考證。

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