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PCR儀反應(yīng)主要步驟
閱讀：1845發(fā)布時(shí)間：2015-10-21
基本的PCR須具備
1.要被復(fù)制的DNA模板 Template
2.界定復(fù)制范圍兩端的引物Primers.
3.DNA聚合酶Taq. Polymearse
4.合成的原料（四種脫氧核苷酸）及水。
PCR儀工作原理
利用升溫使DNA變性，在聚合酶的作用下使單鏈復(fù)制成雙鏈，進(jìn)而達(dá)到基因復(fù)制的目的。
PCR的反應(yīng)包括三個(gè)主要步驟
1. Denaturation
2. Annealing of primers,
3. Extension of primers。
所謂 Denaturing乃是將DNA加熱（至90~95℃）變性， 將雙股的DNA加熱后轉(zhuǎn)為單股DNA以做為復(fù)制的模板. 而Annealing 則是令 Primers于一定的溫度下（冷卻至55~60℃）附著于模板DNA兩端。 zui后在DNA聚合酶e.g. Taq-polymerase 的作用下（加熱至70~75℃）進(jìn)行引物的延長(zhǎng) Extension of primers及另一股的合成。
PCR的zui早設(shè)想核酸研究已有100多年的歷史，本世紀(jì)60年代末、70年代初人們致力于研究基因的體外分離技術(shù)，Korana于1971年zui早提出核酸體外擴(kuò)增的設(shè)想：“經(jīng)過DNA變性，與合適的引物雜交，用DNA聚合酶延伸引物，并不斷重復(fù)該過程便可克隆tRNA基因”。
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