ELISA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*，因此在定量測(cè)定中，每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)值，以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，中央較呈直線的部分是較理想的檢測(cè)區(qū)域。

測(cè)定小分子量物質(zhì)常用競(jìng)爭(zhēng)法，其標(biāo)準(zhǔn)曲線中吸光度與受檢物質(zhì)的濃度呈負(fù)相關(guān)。標(biāo)準(zhǔn)曲線的形狀因試劑盒所用模式的差別而略有不同。ELISA測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線注意圖中橫坐標(biāo)為對(duì)數(shù)關(guān)系，這更有利于測(cè)定系統(tǒng)的表達(dá)。

工作原理

本試劑盒采用雙位點(diǎn)夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），測(cè)定樣品中的水平。向預(yù)先包被抗體的酶標(biāo)孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和HRP標(biāo)記的抗體，經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的組分，然后再加入底物A、B，產(chǎn)生藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺與樣品中的濃度呈正相關(guān)。

T淋巴細(xì)胞亞群CD2 ELISA 試劑盒

1	標(biāo)準(zhǔn)品（100pg/ml）	0.5ml	7	顯色劑A液	6ml
2	標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液	6mL	8	顯色劑B液	6ml
3	酶標(biāo)包被板	12孔×8條	9	終止液	6ml
4	酶標(biāo)試劑	6ml	10	說(shuō)明書(shū)	1份
5	20×濃縮洗滌液	25ml	11	封板膜	2張
6	樣品稀釋液	6ml	12	密封袋	1個(gè)

注：標(biāo)準(zhǔn)品用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液依次稀釋為：100、50、25、12.5、6.25、0 pg/ml

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