詳細(xì)介紹
一、參數(shù)規(guī)格
【產(chǎn)品名稱】:人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA試劑盒
【供貨期】:1-3天(現(xiàn)貨供應(yīng))
【產(chǎn)品用途】:被測(cè)樣品定性定量分析
【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T(兩種規(guī)格)
【檢測(cè)方法】:酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)
【保存條件】:2-8℃
【產(chǎn)品性狀】:液體盒裝
【產(chǎn)品價(jià)格】:(含稅含運(yùn)費(fèi),我們?nèi)烫峁〦LISA實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)和ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè))
【銷售優(yōu)勢(shì)】:價(jià)格行業(yè)優(yōu)勢(shì)、質(zhì)量可靠、如果出現(xiàn)客觀質(zhì)量問題包換退
【待檢樣本】:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等
二、工作原理
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或者標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物顯色。底物在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品濃度呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值,計(jì)算樣品濃度。
三、人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA試劑盒技術(shù)流程
雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原)
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過一夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
間接法(檢測(cè)未知抗體)
1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃過一夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)
3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
四、人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA試劑盒問題解答
Elisa試劑盒陰性對(duì)照及陽(yáng)性對(duì)照解析
Elisa試劑盒陰性對(duì)照及陽(yáng)性對(duì)照:陰、陽(yáng)性對(duì)照若有正確的結(jié)果,對(duì)試劑盒操作的結(jié)果可以有粗略的判斷。
空白對(duì)照:對(duì)ELISA試劑來說,空白對(duì)照實(shí)際上是不加標(biāo)本不加酶做對(duì)照。空白對(duì)照主要測(cè)系統(tǒng)的吸光率??瞻讓?duì)照在單波長(zhǎng)測(cè)量時(shí)顯得尤其重要
我司代理幾千種ELISA試劑盒,數(shù)萬(wàn)種抗體,并代理品牌產(chǎn)品近萬(wàn)種,涉及分子生物學(xué)、分子免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等生命科學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域。為了節(jié)省您的時(shí)間,我們還可以提供代檢測(cè)服務(wù)。
五、人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA試劑盒使用注意事項(xiàng):
1、Elisa試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2、濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果
3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4、請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔OD值的),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5、嚴(yán)格按說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
6、本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
7、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
8、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9、底物請(qǐng)避光保存。
六、我司所售ELISA試劑盒的優(yōu)點(diǎn)體現(xiàn):
特異性高:進(jìn)行了廣泛的非特異性排查,避免了由于交叉反應(yīng)和干擾導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)誤差。
精度高:通過加標(biāo)回收率和線性稀釋實(shí)驗(yàn),確保樣本值的準(zhǔn)確性,精確度高于同類產(chǎn)品(較低的CV%)。
重復(fù)性好:lot-to-lot檢測(cè)確保zui小的批間差異。
可靠性強(qiáng):經(jīng)優(yōu)化的試劑盒組分可有效的阻止假陽(yáng)性和假陰性試驗(yàn)結(jié)果。
標(biāo)準(zhǔn)曲線:在保證精準(zhǔn)數(shù)據(jù)的前提下提供較寬的檢測(cè)范圍,以滿足需求。
價(jià)格低廉:*RD試劑,國(guó)內(nèi)分裝配置,大大減少了客戶因?yàn)閮r(jià)格高而必須購(gòu)買國(guó)產(chǎn)試劑盒的顧慮。
七、人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA試劑盒代測(cè)服務(wù)
客戶以快遞形式送標(biāo)本,上海市內(nèi)客戶代測(cè)樣本可享我司上門取樣服務(wù)。
本公司公布的試劑盒,可以提供代測(cè)服務(wù)。
本公司上尚未列出的試劑盒,可以代為研發(fā)和測(cè)定,費(fèi)用等相關(guān)信息咨詢。