詳細(xì)介紹
一、人膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒簡介
【檢測方法】:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
【產(chǎn)品性狀】:96T/48T,盒裝液體(兩種統(tǒng)一規(guī)格)
【貯藏條件】:2-8°C
【有 效 期】:二年,我公司Elisa試劑盒均為批次,可放心購買。
【主要成分】:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
【種 屬】馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
【產(chǎn)品單價】(ELISA試劑盒具體折扣),可免費代測,含稅含運費。
【標(biāo) 本】血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等
注:標(biāo)本必須為液體,不含沉淀。
ELISA試劑盒原理
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗C3抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗C3抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的C3呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
ELISA試劑盒組成
酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物、樣品稀釋液、濃縮洗滌液、底物液A、底物液B、陽性對照、陰性對照
四、儲存及有效期
于2~8℃避光保存,有效期為12個月。
包被板開封后請于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個月。
二、人膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒操作步驟
(一)樣品準(zhǔn)備
1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。
2.用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋(如2μl血清加入198μl樣品稀釋液中,混勻)。陰、陽性對照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。
(二)檢驗方法
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫。
2.取所需用量酶標(biāo)板條,設(shè)空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl;陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻,置37℃反應(yīng)30分鐘。
5.扣去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,拍干。
6.每孔加酶標(biāo)記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應(yīng)30分鐘。
7.洗滌,同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應(yīng)10分鐘。
9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調(diào)零,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。
三、人膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒注意事項
1. 當(dāng)混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。
2. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
3. 一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。
5. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。
6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時,請以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。
7. 底物請避光保存。
8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。
四、ELISA試劑盒優(yōu)點:
我司共有14000余種ELISA試劑盒物種涵蓋Human,Mouse,Rat等,品種具備以下優(yōu)點:
*品質(zhì)—高品質(zhì)的抗體和試劑是ELISA試劑盒的基礎(chǔ)
精確特異—特異檢測目標(biāo)分子,結(jié)果精確可重復(fù)
高度靈敏—可檢測到pg/mL級別的目標(biāo)
種類齊全—可覆蓋人、大鼠、小鼠、棉鼠、獼猴、豬、馬、犬和貓等多個種屬
優(yōu)化設(shè)計—可拆卸式96孔板(12X8),為血清、血漿、尿樣和細(xì)胞培養(yǎng)物樣本檢測進行優(yōu)化
五、人膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒結(jié)果計算:
在半對數(shù)坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為X軸,相應(yīng)的OD值為Y軸,用四參數(shù)或?qū)?shù)-對數(shù)法繪制zui合適的標(biāo)準(zhǔn)曲線。濃度與OD值成反比關(guān)系,隨著標(biāo)準(zhǔn)品濃度的增加,黃色強度就減少,即OD值減少樣本濃度可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取。如果樣本實驗前進行了稀釋,則試劑盒zui后結(jié)果應(yīng)乘以相應(yīng)的稀釋因子標(biāo)準(zhǔn)曲線為逆向S型曲線。
附:采用全自動酶標(biāo)儀檢測,只需檢測前設(shè)置好酶標(biāo)儀的相關(guān)參數(shù),如坐標(biāo)參數(shù)(線性,半對數(shù))和計算方式參數(shù)(三次回歸、四參數(shù)或雙對數(shù)曲線方程),即可直接得到結(jié)果。
產(chǎn)品名稱存放:收到貨后貯存于4℃,強烈建議盡快使用配制的試劑1X緩沖液貯存于4℃,將不用的微孔板放回至密封袋內(nèi)密封起來,貯存于4℃,已稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品,生物標(biāo)記物,抗體和HRP貯存于4℃。
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